W: Եղբայր, հակադարձ արտագրումն ավարտված է, և վերջապես վերջին քայլը` լյումինեսցենտ քանակական PCR:Այ, եղբայր, ի՞նչ է իրական ժամանակում քանակական PCR-ը:
M:PCR դուք միշտ գիտեք, չէ՞:
W: Գիտեք, PCR-ը պոլիմերազային շղթայական ռեակցիա է, և դա տեխնոլոգիա է, որը մեծացնում է ԴՆԹ-ն:
M:Դա գրեթե… Դա տեխնիկական մեթոդ է հատուկ պրայմերների միջոցով թիրախային հաջորդականությունը ավելի քան մեկ միլիոն անգամ ուժեղացնելու համար, բայց սա միայն ցույց է տալիս թիրախային հաջորդականության առկայությունը կամ բացակայությունը և չի կարող որոշել սկզբնական ձևանմուշի քանակը:Ֆլուորեսցենտային քանակական PCR-ն այս խնդրի լուծման համար մշակված տեխնիկական մեթոդ է:Իրական ժամանակի PCR և քանակական PCR (qPCR) ընդհանուր առմամբ վերաբերում են դրան:
W: Տարբերությունը սովորական PCR-ից ֆլյուորեսցենտային քանակականացման մեջ է:
M: Այո, այսինքն, յուրաքանչյուր PCR ցիկլի երկարացման փուլում հայտնաբերվում է լյումինեսցենտային ազդանշանի ինտենսիվությունը, և կաղապարի սկզբնական գումարը կարող է հաշվարկվել ըստ ազդանշանի ինտենսիվության փոփոխության:
W: Դա այնքան բարդ է թվում:Արդյո՞ք ես պետք է սա ինքս հաշվարկեմ:
M:Սա պահանջում է, որ դուք կամաց-կամաց սովորեք, ամենալավն այն է, որ կարողանաք հասկանալ սկզբունքը:Այժմ դուք կարող եք նախ կենտրոնանալ CT արժեքի վրա, որը համեմատաբար ինտուիտիվ փորձարարական տվյալ է, և դրա չափը համապատասխանում է նախնական ձևանմուշի չափին:Կան նաև գրաֆիկներ, ինչպիսիք են ուժեղացման կորերը և հալման կորերը:Նրանք վերջին խոսքն են ասում, թե արդյոք ձեր փորձը հաջող է, թե ոչ:
W: Օ, եղբայր:Այնուհետև ես կկատարեմ qPCR փորձը:
M:Հատուկ ուշադրություն դարձրեք, որպեսզի ռեագենտների տարածքում կաղապարներ չավելացնեք, այլապես ձեր չօգտագործված խառնուրդը հեշտությամբ կաղտոտվի:
W: հասկացա!

Իրական ժամանակում PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I Kit

Ավելի բարձր արդյունավետություն, ավելի մեծ առանձնահատկություն
Բարձր զգայունություն, լավ համատեղելիություն