Համաճարակի վաղ փուլում, արագ զարգացման շնորհիվ, կասկածելի հիվանդների արագ ախտորոշումը COVID-19-ի կանխարգելման բանալին է։Որոշ հաստատված նուկլեինաթթվի հայտնաբերման ռեակտիվներ ունեն մշակման կարճ ժամանակ, և կան խնդիրներ, ինչպիսիք են արագ աշխատանքի հաստատումը, ռեակտիվների անբավարար օպտիմալացումը և խմբաքանակների միջև մեծ տարբերությունները.Տարբեր կլինիկական լաբորատորիաների խնդիրները նուկլեինաթթվի հայտնաբերման գործընթացի տարբեր ասպեկտներում կարող են ազդել նաև նուկլեինաթթվի հայտնաբերման արդյունքների ճշգրտության վրա:Այս հոդվածը կկենտրոնանա SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի ներկայիս հայտնաբերման առանցքային կապերի և կետերի վրա և կվերլուծի նուկլեինաթթվի լաբորատոր հայտնաբերման և կլինիկական անհամապատասխանության կեղծ բացասական և դրական վերաքննության խնդիրները:

SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի հայտնաբերման սկզբունքները

SARS-CoV-2-ը ՌՆԹ վիրուս է՝ մոտ 29 կբ գենոմի հաջորդականությամբ, 10 գենով, որոնք կարող են արդյունավետորեն կոդավորել 10 սպիտակուցներ։Վիրուսները կազմված են ՌՆԹ-ից և սպիտակուցից, իսկ ամենաարտաքին շերտը արտաքին ծածկույթ է՝ կազմված լիպիդներից և գլիկոպրոտեիններից։Ներսում սպիտակուցային կապսիդը փաթաթում է ՌՆԹ-ն իր մեջ՝ դրանով իսկ պաշտպանելով հեշտությամբ քայքայվող ՌՆԹ-ն (P1):

P1 SARS-COV-2-ի կառուցվածքը

Վիրուսները ներխուժում են բջիջներ բջիջների մակերեսի հատուկ ընկալիչների միջոցով՝ վարակ առաջացնելու համար և օգտագործում են հյուրընկալող բջիջները՝ բազմանալու համար:

Վիրուսային նուկլեինաթթվի հայտնաբերման սկզբունքը վիրուսային ՌՆԹ-ի բացահայտումն է բջիջների լիզատի միջոցով, այնուհետև հայտնաբերման համար իրական ժամանակի ֆլյուորեսցենտային հակադարձ տրանսկրիպցիոն-պոլիմերազային ռեակցիայի (RT-PCR) օգտագործումը:

Հայտնաբերման սկզբունքի բանալին պրայմերների և զոնդերի օգտագործումն է՝ հասնելու նուկլեինաթթուների հաջորդականությունների «նպատակային համապատասխանեցմանը», այսինքն՝ գտնել SARS-CoV-2-ի նուկլեինաթթվի հաջորդականությունը, որը տարբերվում է այլ վիրուսներից մոտ 30000 հիմքերում (նուկլեինաթթվի նմանությունն այլ վիրուսներին) «ցածր» զոնդերի տարածքում), ձևավորում:

Նախաներկերն ու զոնդերը խիստ համընկնում են SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի հատուկ շրջանի հետ, այսինքն՝ առանձնահատկությունը շատ ուժեղ է։Երբ փորձարկվող նմուշի իրական ժամանակի լյումինեսցենտային RT-PCR ուժեղացման արդյունքը դրական է, այն ապացուցում է, որ SARS-CoV-2-ն առկա է նմուշում:Տես P2.

SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի որոշման P2 քայլեր (իրական ժամանակի լյումինեսցենտ RT-PCR)

SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի հայտնաբերման լաբորատորիայի պայմաններն ու պահանջները

Նուկլեինաթթվի փորձարկման լաբորատորիաներն ամենաիդեալականն են բացասական ճնշման միջավայրի համար, և նրանք պետք է ուշադրություն դարձնեն ճնշման մոնիտորինգին, պահպանեն օդի հոսքը և վերացնեն աերոզոլները:Նուկլեինաթթվի փորձարկման անձնակազմը պետք է ունենա համապատասխան որակավորում, անցնի համապատասխան պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի վերապատրաստում և անցնի գնահատումը:Լաբորատորիան պետք է խստորեն կառավարվի, գոտիավորվի տեղում, և ոչ համապատասխան անձնակազմի մուտքը խստիվ արգելված է:Մաքուր տարածքը պետք է օդափոխվի և տեղում ախտահանվի:Համապատասխան իրերը տեղադրվում են գոտիներում, մաքուրն ու կեղտը առանձնացվում են, ժամանակին փոխարինվում և տեղում ախտահանվում:Սովորական ախտահանում. քլոր պարունակող ախտահանիչը հիմնական լուծումն է ավելի մեծ տարածքների համար, իսկ 75% ալկոհոլը կարող է օգտագործվել փոքր տարածքների համար:Աերոզոլների հետ վարվելու լավ միջոց է օդափոխության համար պատուհանների բացումը, իսկ օդի ախտահանումը կարող է իրականացվել նաև ուլտրամանուշակագույն ճառագայթների, ֆիլտրման և օդի ախտահանման միջոցով:

SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի որոշման հիմնական հղումներն ու պարամետրերը (իրական ժամանակի ֆլուորեսցենտային RT-PCR)

Թեև լաբորատորիաները հիմնականում մեծ ուշադրություն են դարձնում նուկլեինաթթվի «հայտնաբերմանը», իրականում նուկլեինաթթվի «արդյունահանումը» նույնպես հաջող հայտնաբերման հիմնական քայլերից մեկն է, որը սերտորեն կապված է վիրուսի նմուշների հավաքման և պահպանման հետ:

Ներկայումս առավել լայնորեն կիրառվող շնչառական նմուշները, ինչպիսիք են քիթ-կոկորդը, օգտագործում են երկրորդ մեթոդը, որն իրենից ներկայացնում է ինակտիվացման (պահպանման) լուծույթ, որը պատրաստված է նուկլեինաթթվի արդյունահանման և լիզի լուծույթի հիման վրա:Մի կողմից, վիրուսի պահպանման այս լուծույթը կարող է դեֆորմացնել վիրուսի սպիտակուցը, կորցնել իր ակտիվությունը և այլևս վարակիչ չլինել, ինչպես նաև բարելավել տեղափոխման և հայտնաբերման փուլի անվտանգությունը.մյուս կողմից, այն կարող է ուղղակիորեն կոտրել վիրուսը, որպեսզի ազատի նուկլեինաթթուն, վերացնի նուկլեինաթթվի քայքայվող ֆերմենտը և կանխի վիրուսը:ՌՆԹ-ն քայքայված է:

Վիրուսի նմուշառման լուծույթ, որը պատրաստված է նուկլեինաթթվի արդյունահանման լուծույթի հիման վրա:Հիմնական բաղադրիչներն են հավասարակշռված աղերը, էթիլենդիամինտետրաքացախաթթվի քելատացնող նյութը, գուանիդինի աղը (գուանիդինի իզոթիոցիանատ, գուանիդինի հիդրոքլորիդ և այլն), անիոնային մակերևութային ակտիվ նյութ (դոդեկան), նատրիումի սուլֆատ), կատիոնային մակերևութային ակտիվ նյութ (տետրադեցիլ տրիմեթիլ ամոնիում, դիհիդրելօքսի, դիհիդրոքսիլաթթու, դիհիդրօքսիոլաթթու): ase K և այլ մի քանի կամ ավելի բաղադրիչներ:Ներկայումս կան բազմաթիվ տեսակի նուկլեինաթթուների արդյունահանման հավաքածուներ, և օգտագործվում են տարբեր նուկլեինաթթվի արդյունահանման և մաքրման ռեակտիվներ:Նույնիսկ եթե օգտագործվում է նույն նուկլեինաթթվի արդյունահանման և մաքրման ռեագենտը, յուրաքանչյուր փաթեթի արդյունահանման ընթացակարգերը տարբեր են:

Ներկայումս նուկլեինաթթուների հայտնաբերման հավաքածուի արտադրանքները, որոնք հաստատվել են Բժշկական արտադրանքի ազգային վարչության կողմից, ընտրվում են SARS-CoV-2 գենոմի ORF1ab, E և N գեների հիման վրա:Տարբեր արտադրանքների հայտնաբերման սկզբունքները հիմնականում նույնն են, բայց դրանց այբբենարանները և զոնդերի դիզայնը տարբեր են:Կան միանպատակային հատվածներ (ORF1ab), երկթիրախային հատվածներ (ORF1ab, N կամ E) և երեք թիրախային հատվածներ (ORF1ab, N և E):Հայտնաբերման և մեկնաբանման, նուկլեինաթթվի արդյունահանման և իրական ժամանակի լյումինեսցենտային RT-PCR ռեակցիայի համակարգի միջև տարբերությունը պետք է վերաբերի համապատասխան փաթեթի հրահանգներին, և խորհուրդ է տրվում, որ օգտագործողները խստորեն հետևեն մեկնաբանման մեթոդին, որը նշված է մեկնաբանության համար փաթեթի հրահանգներում:Ընդհանուր շրջանները, պրայմերները և զոնդերի հաջորդականությունները, որոնք ուժեղացված են իրական ժամանակի ֆլուորեսցենտային RT-PCR-ով, ներկայացված են P3-ում:

P3 SARS-CoV-2 ամպլիկոնի թիրախի գտնվելու վայրը գենոմի վրա և պրայմերների և զոնդերի հաջորդականությունը

SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի որոշման արդյունքների մեկնաբանում (Real-Time fluorescent RT-PCR)

«SARS-CoV-2 վարակի համար թոքաբորբի կանխարգելման և վերահսկման պլանը (Երկրորդ հրատարակություն)» առաջին անգամ պարզաբանեց մեկ գենի ամպլիֆիկացիայի արդյունքները դատելու չափանիշները.

1. Ոչ մի Ct կամ Ct≥40 բացասական չէ;

2. Ct<37 դրական է;

3. 37-40-ի Ct արժեքը գորշ մասշտաբի տարածքն է:Խորհուրդ է տրվում կրկնել փորձը։Եթե ​​Ct<40 կրկնելու արդյունքը և ուժեղացման կորը ունեն ակնհայտ պիկեր, ապա նմուշը գնահատվում է որպես դրական, հակառակ դեպքում՝ բացասական»։

Ուղեցույցի երրորդ հրատարակությունը և ուղեցույցի չորրորդ հրատարակությունը շարունակեցին վերը նշված չափանիշները:Այնուամենայնիվ, առևտրային փաթեթներում օգտագործվող տարբեր թիրախների պատճառով ուղեցույցի վերոհիշյալ 3-րդ հրատարակությունը չի տվել թիրախների համակցումը որոշելու չափանիշները, ընդգծելով, որ արտադրողի կողմից տրված հրահանգները գերակայում են:Ուղեցույցների հինգերորդ հրատարակությունից սկսած՝ երկու թիրախ են հստակեցվել, հատկապես մեկ թիրախի համար դատողության չափանիշները, որոնք դժվար է դատել:Այսինքն, եթե լաբորատորիան ցանկանում է հաստատել, որ դեպքը դրական է SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի հայտնաբերման համար, ապա պետք է բավարարվեն հետևյալ 2 պայմաններից 1-ը.

(1) SARS-CoV-2-ի երկու թիրախ (ORF1ab, N) նույն նմուշում դրական են փորձարկվել իրական ժամանակի ֆլուորեսցենտային RT-PCR-ով:Եթե ​​մեկ թիրախը դրական է, ապա պահանջվում է կրկնակի նմուշառում և փորձարկում:Եթե ​​թեստի արդյունքներն են Եթե մեկ թիրախը դեռ դրական է, ապա այն գնահատվում է որպես դրական:

(2) Իրական ժամանակի լյումինեսցենտային RT-PCR-ի երկու նմուշները ցույց տվեցին մեկ թիրախ դրական միաժամանակ կամ նույն տեսակի երկու նմուշները ցույց տվեցին մեկ թիրախային դրական թեստի արդյունք, որը կարելի է գնահատել որպես դրական:Այնուամենայնիվ, ուղեցույցները նաև ընդգծում են, որ նուկլեինաթթվի փորձարկման բացասական արդյունքները չեն կարող բացառել SARS-CoV-2 վարակը:Պետք է բացառվեն այն գործոնները, որոնք կարող են կեղծ բացասականներ առաջացնել, այդ թվում՝ նմուշի վատ որակը (շնչառական նմուշներ բերանից և այլ մասերից), նմուշների հավաքումը շատ վաղ կամ շատ ուշ, Նմուշները ճիշտ չեն պահվել, չեն տեղափոխվել և չեն մշակվել, և տեխնոլոգիան ինքնին խնդիրներ է ունեցել (վիրուսի տատանումներ, PCR արգելակում) և այլն:

Կեղծ բացասականի պատճառները SARS-CoV-2-ի հայտնաբերման մեջ

Նուկլեինաթթվի թեստում «կեղծ բացասական» հասկացությունը, որը ներկայումս մտահոգված է, հաճախ վերաբերում է «կեղծ բացասականներին», որոնցում նուկլեինաթթվի թեստի արդյունքները անհամապատասխան են կլինիկական դրսևորումներին, այսինքն՝ կլինիկական ախտանշանները և պատկերավորման արդյունքները խիստ կասկածվում են COVID-19-ի համար, բայց նուկլեինաթթվի թեստերը միշտ «բացասական» են շատ անգամ:Առողջապահության ազգային հանձնաժողովի Կլինիկական լաբորատոր կենտրոնը բացատրել է «կեղծ բացասական» SARS-CoV-2 թեստը։

(1) Վարակված անձի բջիջներում կա որոշակի քանակությամբ վիրուս:Առկա տվյալները ցույց են տալիս, որ օրգանիզմը վիրուսով վարակվելուց հետո վիրուսը քթի և բերանի միջոցով ներթափանցում է կոկորդ, այնուհետև շնչափող և բրոնխներ, իսկ հետո հասնում ալվեոլներ։Վարակված անձը կզգա ինկուբացիոն շրջանը, թեթև ախտանիշները, այնուհետև ծանր ախտանիշների ընթացքը և հիվանդության տարբեր փուլերը:Իսկ մարմնի տարբեր մասերում առկա վիրուսի քանակը տարբեր է:

Բջիջների տեսակների վիրուսային ծանրաբեռնվածության առումով՝ ալվեոլային էպիթելային բջիջներ (ստորին շնչուղիներ)> օդուղիների էպիթելի բջիջներ (վերին շնչուղիներ)> ֆիբրոբլաստներ, էնդոթելային բջիջներ և մակրոֆագներ և այլն;Նմուշի տեսակից՝ ալվեոլային լվացման հեղուկ (առավել գերազանց)>խորը հազի թուք>քթանցքային շվաբր>օրոֆարինգալ շվաբր>արյուն:Բացի այդ, վիրուսը կարող է հայտնաբերվել նաև կղանքի մեջ։Այնուամենայնիվ, հաշվի առնելով վիրահատության հարմարավետությունը և հիվանդների ընդունումը, սովորաբար օգտագործվող կլինիկական նմուշի կարգն է՝ օրոֆարինգային շվաբր> քթանցքային շվաբր> բրոնխիալ լվացման հեղուկ (բարդ վիրահատություն) և խորը խորխ (սովորաբար չոր հազ, դժվար է ձեռք բերել):

Ուստի որոշ հիվանդների օրոֆարնսի կամ քիթ-կոկորդի բջիջներում վիրուսի քանակը փոքր է կամ չափազանց ցածր։Եթե ​​հետազոտության համար վերցվեն միայն օրոֆարինքսի կամ քիթ-կոկորդի նմուշներ, վիրուսի նուկլեինաթթուն չի հայտնաբերվի:

(2) Նմուշների հավաքման ընթացքում վիրուս պարունակող բջիջներ չեն հավաքվել, կամ վիրուսային նուկլեինաթթուն արդյունավետորեն չի պահպանվել:

[① Անպատշաճ հավաքման վայր, օրինակ՝ բերանային շվաբրեր հավաքելիս հավաքման խորությունը բավարար չէ, քթի խոռոչի խորքում հավաքված քթի խոռոչի շվաբրերը չեն հավաքվում և այլն։

②Նմուշառման շվաբրերը սխալ են օգտագործվում:Օրինակ, շվաբրի գլխի նյութի համար առաջարկվում են սինթետիկ մանրաթելեր, ինչպիսիք են PE մանրաթելը, պոլիեսթեր մանրաթելը և պոլիպրոպիլենային մանրաթելը:Բնական մանրաթելեր, ինչպիսիք են բամբակը, օգտագործվում են փաստացի շահագործման մեջ (սպիտակուցի ուժեղ կլանումը և հեշտ չէ լվանալը) և նեյլոնե մանրաթելերը (ջրի վատ կլանումը, ինչը հանգեցնում է նմուշառման անբավարար ծավալի);

③Վիրուսների պահեստավորման խողովակների սխալ օգտագործումը, ինչպես օրինակ՝ պոլիպրոպիլենային կամ պոլիէթիլենային պլաստիկ պահեստավորման խողովակների սխալ օգտագործումը, որոնք հեշտությամբ կլանվում են նուկլեինաթթուները (ԴՆԹ/ՌՆԹ), ինչը հանգեցնում է պահեստավորման լուծույթում նուկլեինաթթվի կոնցենտրացիայի նվազմանը:Գործնականում խորհուրդ է տրվում օգտագործել պոլիէթիլեն-պրոպիլենային պոլիմերային պլաստիկ և որոշ հատուկ մշակված պոլիպրոպիլենային պլաստիկ տարաներ վիրուսային նուկլեինաթթուներ պահելու համար:]

[① Անպատշաճ հավաքման վայր, օրինակ՝ բերանային շվաբրեր հավաքելիս հավաքման խորությունը բավարար չէ, քթի խոռոչի խորքում հավաքված քթի խոռոչի շվաբրերը չեն հավաքվում և այլն։

②Նմուշառման շվաբրերը սխալ են օգտագործվում:Օրինակ, շվաբրի գլխի նյութի համար առաջարկվում են սինթետիկ մանրաթելեր, ինչպիսիք են PE մանրաթելը, պոլիեսթեր մանրաթելը և պոլիպրոպիլենային մանրաթելը:Բնական մանրաթելեր, ինչպիսիք են բամբակը, օգտագործվում են փաստացի շահագործման մեջ (սպիտակուցի ուժեղ կլանումը և հեշտ չէ լվանալը) և նեյլոնե մանրաթելերը (ջրի վատ կլանումը, ինչը հանգեցնում է նմուշառման անբավարար ծավալի);

③Վիրուսների պահեստավորման խողովակների սխալ օգտագործումը, ինչպես օրինակ՝ պոլիպրոպիլենային կամ պոլիէթիլենային պլաստիկ պահեստավորման խողովակների սխալ օգտագործումը, որոնք հեշտությամբ կլանվում են նուկլեինաթթուները (ԴՆԹ/ՌՆԹ), ինչը հանգեցնում է պահեստավորման լուծույթում նուկլեինաթթվի կոնցենտրացիայի նվազմանը:Գործնականում խորհուրդ է տրվում օգտագործել պոլիէթիլեն-պրոպիլենային պոլիմերային պլաստիկ և որոշ հատուկ մշակված պոլիպրոպիլենային պլաստիկ տարաներ վիրուսային նուկլեինաթթուներ պահելու համար:]

(4) Կլինիկական լաբորատոր գործունեությունը ստանդարտացված չէ:Նմուշների տեղափոխման և պահպանման պայմանները, կլինիկական լաբորատորիաների ստանդարտացված շահագործումը, արդյունքների մեկնաբանումը և որակի վերահսկումը հիմնական գործոններն են, որոնք ապահովում են թեստի արդյունքների ճշգրտությունն ու հուսալիությունը:Առողջապահության ազգային հանձնաժողովի Կլինիկական լաբորատոր կենտրոնի կողմից 2020 թվականի մարտի 16-24-ը կատարած որակի արտաքին գնահատման արդյունքների համաձայն՝ վավեր արդյունք ստացած 844 լաբորատորիաներից 701-ը (83,1%) որակավորվել են, իսկ 143-ը (16,9%)՝ ոչ։Որակավորված, լաբորատոր փորձարկման ընդհանուր պայմանները լավ են, բայց տարբեր լաբորատորիաները դեռևս ունեն տարբերություններ անձնակազմի գործառնական կարողությունների, մեկ թիրախային դրական նմուշի մեկնաբանման կարողության և որակի վերահսկման մեջ:

Ինչպե՞ս նվազեցնել SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի հայտնաբերման կեղծ բացասականությունը:

Նուկլեինաթթվի հայտնաբերման մեջ կեղծ բացասականների կրճատումը պետք է օպտիմիզացված լինի կեղծ բացասականների ստեղծման չորս ասպեկտներից:

(1) Վարակված անձի բջիջներում կա որոշակի քանակությամբ վիրուս:Կասկածելի վարակվածների մարմնի տարբեր մասերում վիրուսի կոնցենտրացիան տարբեր ժամանակներում տարբեր կլինի։Եթե ​​ֆարինքս չկա, այն կարող է լինել բրոնխի լվացման հեղուկի կամ կղանքի մեջ:Եթե ​​փորձարկման համար կարող են հավաքվել մի քանի տեսակի նմուշներ կամ հիվանդության առաջընթացի տարբեր փուլերում, կօգնի խուսափել կեղծ բացասականից:

(2) Վիրուսը պարունակող բջիջները պետք է հավաքվեն նմուշների հավաքման ժամանակ:Այս խնդիրը կարելի է մեծ չափով լուծել՝ ուժեղացնելով նմուշ հավաքողների ուսուցումը։

(3) Վստահելի IVD ռեակտիվներ:Ազգային մակարդակով ռեակտիվների հայտնաբերման արդյունավետության գնահատման վերաբերյալ հետազոտություններ կատարելով և առկա խնդիրները քննարկելով՝ ռեակտիվների հայտնաբերման արդյունավետությունը կարող է հետագայում բարելավվել և վերլուծության զգայունությունը կարող է բարելավվել:

(4) Կլինիկական լաբորատորիաների ստանդարտացված գործունեությունը.Ամրապնդելով լաբորատոր անձնակազմի պատրաստվածությունը, շարունակաբար կատարելագործելով լաբորատորիայի որակի կառավարման համակարգը, ապահովելով խելամիտ բաժանումներ և բարելավելով անձնակազմի հայտնաբերման կարողությունը՝ հնարավոր է նվազեցնել կեղծ բացասականները՝ կապված ոչ պատշաճ լաբորատոր գործունեության հետ:

Ապաքինված և դուրս գրված հիվանդների մոտ SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի թեստի կրկնակի դրական արդյունքի պատճառները

«Քուիդ -1 Ախտորոշման եւ բուժման պլանը» հստակ սահմանում է, որ հիվանդանոցից բուժվելու եւ լիցքաթափվելու չափորոշիչներից մեկը ունի երկու անընդմեջ շնչուղիների ստուգում (առնվազն 24 ժամ):

(1)SARS-CoV-2-ը նոր վիրուս է։Անհրաժեշտ է հետագայում հասկանալ դրա պաթոգեն մեխանիզմը, առաջացած հիվանդության ամբողջական պատկերը և հիվանդության ընթացքի առանձնահատկությունները:Ուստի, մի կողմից, անհրաժեշտ է ուժեղացնել դուրս գրված հիվանդների կառավարումը և անցկացնել 14-օրյա բժշկական դիտարկում։Իրականացնել հետևողականություն, առողջության մոնիտորինգ և առողջապահական ուղղորդում՝ խորացնելու հիվանդության առաջացման, զարգացման և ելքի ողջ գործընթացի ըմբռնումը:

(2) Հիվանդը կարող է նորից վարակվել վիրուսով:Ակադեմիկոս Չժոնգ Նանշանն ասաց. Քանի որ բուժված հիվանդներն ունեն հակամարմիններ, SARS-CoV-2-ը կարող է վերացվել հակամարմինների միջոցով, երբ նրանք նորից ներխուժեն:Կան բազմաթիվ պատճառներ, որոնք կարող են լինել առողջացած հիվանդի պատճառը, կամ դա կարող է կապված լինել վիրուսի մուտացիայի հետ կամ նույնիսկ լաբորատոր հետազոտության պատճառի հետ։Եթե ​​դա հենց վիրուսն է, ապա SARS-CoV-2 մուտացիան կարող է պատճառ դառնալ, որ վերականգնված հիվանդի արտադրած հակամարմինն անարդյունավետ լինի մուտացված վիրուսի դեմ:Եթե ​​հիվանդը կրկին վարակվում է մուտացիայի ենթարկված վիրուսով, ապա նուկլեինաթթվի թեստը կարող է կրկին դրական լինել:

(3) Ինչ վերաբերում է լաբորատոր փորձարկման մեթոդներին, ապա փորձարկման յուրաքանչյուր մեթոդ ունի իր սահմանափակումները:SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի հայտնաբերումը պայմանավորված է գեների հաջորդականության ընտրությամբ, ռեագենտների կազմով, մեթոդի զգայունությամբ և այլ պատճառներով, ինչը հանգեցնում է նրան, որ գոյություն ունեցող փաթեթներն ունեն հայտնաբերման իրենց ավելի ցածր սահմանները:Հիվանդի բուժումից հետո օրգանիզմում վիրուսը նվազում է։Երբ փորձարկվող նմուշում վիրուսային ծանրաբեռնվածությունը ցածր է հայտնաբերման ստորին սահմանից, կհայտնվի «բացասական» արդյունք:Սակայն այս արդյունքը չի նշանակում, որ օրգանիզմում վիրուսն ամբողջությամբ անհետացել է։Վիրուսը կարող է լինել բուժման դադարեցումից հետո:Resurgence», շարունակեք պատճենել:Ուստի խորհուրդ է տրվում շաբաթը մեկ անգամ վերանայել դուրս գրվելուց հետո 2-4 շաբաթվա ընթացքում:

(4) Նուկլեինաթթուն վիրուսի գենետիկ նյութն է։Վիրուսը սպանվում է այն բանից հետո, երբ հիվանդը անցել է հակավիրուսային բուժում, սակայն վիրուսային ՌՆԹ-ի մնացած բեկորները դեռ պահպանվում են մարդու մարմնում և ամբողջությամբ դուրս չեն գալիս մարմնից:Երբեմն, որոշակի հանգամանքներում, այն կարող է ավելի շատ պահպանվել:Երկար ժամանակ, և այս պահին նուկլեինաթթվի թեստը «անցողիկ» դրական կլինի։Հիվանդի վերականգնման ժամանակահատվածի երկարաձգմամբ, մարմնում մնացորդային ՌՆԹ-ի բեկորների աստիճանական սպառումից հետո, նուկլեինաթթվի թեստի արդյունքը կարող է բացասական դառնալ:

(5) SARS-CoV-2-ի նուկլեինաթթվի թեստի արդյունքը միայն ապացուցում է վիրուսային ՌՆԹ-ի առկայությունը կամ բացակայությունը և չի կարող ապացուցել վիրուսի ակտիվությունը և արդյոք վիրուսը փոխանցելի է։Պետք է ապացուցել, թե հիվանդը, ում մոտ կրկին նուկլեինաթթվի թեստ է ստացվել, նորից վարակի աղբյուր կդառնա՞։Անհրաժեշտ է վիրուսային կուլտուրա իրականացնել կլինիկական նմուշների վրա և մշակել «կենդանի» վիրուս՝ ապացուցելու, որ այն վարակիչ է:

Ամփոփում

Ամփոփելով, SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի փորձարկումների կեղծ բացասական արդյունքները, վերստուգման դրական արդյունքները և այլ պայմանները, որոնք անհամապատասխան են կլինիկական դրսևորումներին, հնարավոր չէ ամբողջությամբ խուսափել:Իրական սքրինինգի և թեստավորման ժամանակ խորհուրդ է տրվում համատեղել կլինիկական ախտանշանները, պատկերային հետազոտությունները (CT) և փորձերը Լաբորատոր թեստի (նուկլեինաթթվի թեստ + վիրուսին հատուկ հակամարմինների թեստ) համապարփակ ախտորոշման համար՝ բաց թողնված ախտորոշումը և սխալ ախտորոշումը կանխելու համար:Եթե ​​պարզվում է, որ թեստի արդյունքներն ակնհայտորեն անհամապատասխան են կլինիկական դրսևորումներին, խորհուրդ է տրվում կատարել ամբողջ թեստային կապի համապարփակ վերլուծություն (նմուշների հավաքում, շրջանառություն և մշակման հղումներ)՝ բացառելու SARS-CoV-2 վիրուսի վաղ վարակը, կրկնվող վարակը կամ զուգակցված այլ շնչառական վիրուսային վարակների և այլն:Եթե ​​պայմանները թույլ են տալիս, խորհուրդ է տրվում հավաքել ավելի զգայուն նմուշներ, ինչպիսիք են խորխը կամ ալվեոլային լվացման հեղուկը կրկին հետազոտության համար:

Առնչվող ապրանքներ:

SARS-CoV-2 նուկլեինաթթվի հայտնաբերման հավաքածու (Multiplex PCR լյումինեսցենտային զոնդի մեթոդ)