PCR-ի ծնունդը
PCR (պոլիմերազային շղթայական ռեակցիա)
Պոլիմերազային շղթայական ռեակցիայի հայտնագործումից անցել է ավելի քան 30 տարի։Ավելի քան 30 տարի, այն բանից հետո, երբ ամբողջ աշխարհում բազմաթիվ գիտնականներ շարունակում են լրացնել և կատարելագործվել, PCR տեխնոլոգիան դարձել է ամենալայն և հաճախ օգտագործվող և ամենակարևոր հիմնական հետազոտական մեթոդը ողջ կյանքի գիտությունների ոլորտում:
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR և այլն, որոնք մշակվել են ավանդական PCR տեխնոլոգիայի լայն կիրառման հիման վրա, ինչպես նաև նոր ի հայտ եկած թվային PCR (թվային PCR), մեծապես հարստացրել են գիտական հետազոտողների մեծամասնության հետազոտական մեթոդները և մեծապես արագացրել են ժամանակակից կենսաբանական գիտությունների զարգացման գործընթացը, հատկապես մոլեկուլային կենսաբանության, որը մեծ ներդրում է ունեցել մարդու կյանքի և ողջ բնության ուսումնասիրության մեջ:
Ավանդական PCR տեխնոլոգիայի թերությունները
Բարդ նուկլեինաթթվի տարանջատում ևարդյունահանում:
★ Ավանդական PCR տեխնոլոգիա. պահանջվում է
★ PCR ստացված տեխնոլոգիա՝ պահանջվում է
★ ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի նմուշներ. մեծ տարբերություններ, աշխատանքի դժվար պահանջներ
★ Մարմնի վտանգներ. թունավոր ռեակտիվները վնասում են օրգանիզմին
Ավանդական PCR տեխնոլոգիան և ածանցյալ տեխնոլոգիան ունեն նախապայման՝ նուկլեինաթթվի տարանջատում և մաքրում
Ցանկացած կենսաբանական նմուշ պետք է անցնի մի շարք բարդ և հոգնեցուցիչ նմուշների մշակում` նուկլեինաթթվի նմուշներ ստանալու համար, որոնք համապատասխանում են PCR տեխնոլոգիայի պահանջներին:
ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի տարանջատումը և արդյունահանումը միշտ եղել է հիմնական խնդիր, որը համապատասխան գիտական հետազոտողները պետք է ամեն օր կրկնեն:
Նմուշների միջև հսկայական տարբերությունների պատճառով ԴՆԹ-ի և ՌՆԹ-ի տարանջատման և արդյունահանման գործընթացները նույնպես շատ տարբեր են:Այս աշխատանքը օպերատորների համար պահանջում է տեխնիկական գիտելիքների բարձր մակարդակ:Ավանդական տարանջատման և արդյունահանման տեխնիկան պահանջում է երկարատև շփում որոշ խիստ թունավոր քիմիական ռեակտիվների հետ:Այն անդառնալի վնաս կհասցնի օպերատորի մարմնին, իսկ փորձի ընթացքում նույնիսկ ուղղակի վնաս կհասցնի։
Միևնույն ժամանակ, նրանց համար, ովքեր ունեն ուսումնասիրելու մեծ քանակությամբ նմուշներ, նուկլեինաթթուների առանձնացումը և արդյունահանումը աշխատատար խնդիր է:
Նուկլեինաթթվի մեկուսացման և արդյունահանման հավաքածուները շուկայում այժմ հասուն են և կան բազմաթիվ ապրանքանիշեր, բայց դրանք մոտավորապես նույնն են:Անկախ նրանից, թե դա սիլիկա գել թաղանթային սյունակի կենտրոնախույս հավաքածու է, թե մագնիսական բշտիկի մեթոդի հավաքածու, դա շատ ժամանակ է պահանջում և ծախսատար է:Բացի լրակազմի արժեքից, կան նաև հատուկ պահանջներ լաբորատոր սարքավորումների համար:Մագնիսական բշտիկի մեթոդով օգտագործվող ավտոմատացված աշխատակայանը շատ բնորոշ մեծածավալ բարձրարժեք սարքավորում է, որը հսկայական ծախս է լաբորատորիայի համար։
արդյունքում
Նախքան PCR-ի փորձարկումները, նմուշների նախնական մշակումն անխուսափելի և միշտ գլխացավանք է հետազոտողների համար:Ինչպես լուծել այս խնդիրը և արդյոք PCR փորձերը կարող են իրականացվել առանց նուկլեինաթթուների տարանջատման և արդյունահանման, միշտ եղել է գիտական հետազոտողների և կլինիկական լաբորատորիայի անձնակազմի մեծամասնության մտածելակերպը:
Foregene-ի լուծումը
Direct PCR տեխնոլոգիայի և հարակից փաթեթների երկար տարիների տքնաջան հետազոտությունից հետո Forgene-ը հաջողությամբ ճեղքեց բազմաթիվ խոչընդոտներ և հաջողությամբ հասավ ուղիղ PCR տարբեր տեսակի տարբեր նմուշների համար՝ ուժեղ դիմադրողականությամբ և հարմարվողականությամբ՝ թույլ տալով հետազոտողներին ազատվել նուկլեինաթթուների ծանր և վտանգավոր տարանջատումից և արդյունահանումից:Սա մեծապես կնվազեցնի բոլորի աշխատանքի ինտենսիվությունը, կարագացնի փորձի գործընթացը և կխնայի գիտական հետազոտությունների և փորձարկման ծախսերը:
Forgene-ի DirectPCR-ի իմացությունն ու իմացությունը
Նախ, DirectPCR տեխնոլոգիան ուղղակի PCR տեխնոլոգիա է տարբեր կենսաբանական նմուշների հյուսվածքների համար:Այս տեխնիկական պայմաններում նուկլեինաթթուների առանձնացման և արդյունահանման կարիք չկա, և հյուսվածքի նմուշն ուղղակիորեն օգտագործվում է որպես առարկա, իսկ թիրախ գենի պրայմերները ավելացվում են PCR ռեակցիայի համար:
Երկրորդ, DirectPCR տեխնոլոգիան ոչ միայն ավանդական ԴՆԹ կաղապարի ուժեղացման տեխնոլոգիա է, այլ նաև ներառում է ՌՆԹ կաղապարի հակադարձ տառադարձման PCR:
Երրորդ, DirectPCR տեխնոլոգիան ոչ միայն ուղղակիորեն իրականացնում է սովորական որակական PCR ռեակցիաներ հյուսվածքների նմուշների վրա, այլ նաև ներառում է իրական ժամանակի qPCR ռեակցիաներ, որոնք պահանջում են, որ ռեակցիայի համակարգը դիմադրի ֆոնային ֆլուորեսցենտային միջամտությանը և հակադրի էնդոգեն ֆլուորեսցենտային հանգցնողներին:
Չորրորդ՝ DirectPCR տեխնոլոգիայի թիրախավորված հյուսվածքների նմուշները պահանջում են միայն նուկլեինաթթվի կաղապարների ազատում և չեն հեռացնում սպիտակուցները, պոլիսախարիդները, աղի իոնները և այլն, որոնք խանգարում են PCR ռեակցիային:Սա պահանջում է, որ ռեակցիայի համակարգում նուկլեինաթթվի պոլիմերազը և PCR Mix-ը ունենան գերազանց հակադարձելիություն և հարմարվողականություն, և կարող են ապահովել ֆերմենտի ակտիվությունը և վերարտադրման ճշգրտությունը բարդ պայմաններում:
Հինգերորդ, DirectPCR տեխնոլոգիայի թիրախավորված հյուսվածքների նմուշները չեն ենթարկվել որևէ նուկլեինաթթվի հարստացման բուժման, և կաղապարի քանակը շատ փոքր է, ինչը պահանջում է չափազանց բարձր զգայունություն և ռեակցիայի համակարգի ուժեղացման արդյունավետություն:
Եզրակացություն
DirectPCR տեխնոլոգիան ամենակարևոր տեխնոլոգիական զարգացումներից և նորամուծություններից մեկն է վերջին 30 տարիների ընթացքում PCR տեխնոլոգիայի ծնունդից հետո:Forgene-ը եղել է և կշարունակի լինել այս տեխնոլոգիայի առաջամարտիկն ու նորարարը:
DirectPCR տեխնոլոգիայի կիրառման հեռանկարը շատ լայն է:Այս տեխնոլոգիայի շարունակական կատարելագործումն ու առաջմղումը, անշուշտ, դիվերսիոն փոփոխություններ կբերի գիտահետազոտական և տեսչական աշխատանքներին:Սա PCR տեխնոլոգիայի հեղափոխություն է:
Հրապարակման ժամանակը` Փետրվար-21-2017