Building SOP System

Ստեղծել PCR փորձարարական SOP՝ փորձարարական անձնակազմի վարքագիծը ստանդարտացնելու համար:

Փորձարարները խստորեն պահպանում են գործառնական ընթացակարգերը և նվազագույնի են հասցնում PCR աղտոտումը, որը կարող է առաջանալ մարդկային գործոնների հետևանքով կամ կանխել աղտոտման առաջացումը վիրահատության ընթացքում:Բացի այդ, փորձարարը պետք է ունենա համապատասխան մասնագիտական ​​գիտելիքներ և հմտություններ, ներառյալ հարակից սարքավորումների շահագործման հմտությունները, աշխատանքային ողջ գործընթացը պարզաբանելու, աղտոտման բուժման մեթոդներին և լաբորատոր որակի վերահսկման մեթոդներին տիրապետելու և թեստի արդյունքները ճիշտ մեկնաբանելու ունակություն:

Շինարարական ստանդարտ PCR լաբորատորիա

PCR լաբորատորիան սկզբունքորեն բաժանված է չորս ոլորտների, մասնավորապես՝ ռեագենտի պատրաստման տարածք, նմուշի մշակման տարածք, ուժեղացման տարածք և ուժեղացման արտադրանքի վերլուծության տարածք:Առաջին երկու տարածքները նախաամպլիֆիկացիոն տարածքներ են, իսկ վերջին երկու տարածքները՝ հետուժեղացման տարածքներ:Նախաուժեղացման գոտին և հետուժեղացման գոտին պետք է խստորեն տարանջատվեն:Փորձարարական նյութերը, ռեակտիվները, ձայնագրող թուղթը, գրիչները, մաքրող նյութերը և այլն կարող են հոսել միայն նախաուժեղացման տարածքից դեպի հետուժեղացման տարածք, այսինքն՝ ռեագենտի պատրաստման, նմուշի մշակման տարածքից, ուժեղացման տարածքից և ուժեղացման արտադրանքի վերլուծության տարածքից և չպետք է հոսեն հակառակ ուղղությամբ:Լաբորատորիայում օդի հոսքը նույնպես պետք է հոսի նախաուժեղացման տարածքից դեպի հետուժեղացման տարածք, այլ ոչ թե հակառակ ուղղությամբ:

Կրճատել փորձնական քայլերը

Եթե ​​լաբորատորիան կատարում է միայն ՊՇՌ հայտնաբերում և նույնականացում, խորհուրդ է տրվում օգտագործել լյումինեսցենտային քանակական ՊՇՌ սովորական ՊՇՌ-ի փոխարեն:

Ֆլյուորեսցենտային քանակական PCR հայտնաբերման արդյունքները կարող են հավաքվել և վերլուծվել լյումինեսցենտային ազդանշաններով, ուստի ռեակցիայից հետո էլեկտրոֆորեզի համար կափարիչը բացելու կարիք չկա, ինչը խուսափում է PCR արտադրանքի աղտոտումից, որն առաջանում է ռեակցիայի արտադրանքի արտահոսքից՝ աերոզոլներ ձևավորելու համար:Եթե ​​գելային էլեկտրոֆորեզի բեռնման փուլի ընթացքում ավելացնեք գլխարկների բացվածքների քանակը, հնարավոր է, որ տեղի ունենա աերոզոլային աղտոտում:Խորհուրդ է տրվում նպաստել քանակական ՊՇՌ-ի կիրառմանը և աստիճանաբար փոխարինել որակական ՊՇՌ-ին:

Ընդունել UNG հակաաղտոտման համակարգը

PCR ռեակցիայի համար օգտագործվում է UNG հակա-PCR արտադրանքի աղտոտման համակարգը:

Համակարգն օգտագործում է dUTP՝ dTTP-ի փոխարեն:PCR ռեակցիայից հետո բոլոր PCR արտադրանքները (ԴՆԹ-ի բեկորները) ներառվում են dUTP-ի հետ;PCR ռեակցիայի հաջորդ փուլում համակարգին ավելացված UNG ֆերմենտը ինկուբացվում է 37°C ջերմաստիճանում 5 րոպե առաջ PCR-ից առաջ, որը կարող է լինել սպեցիֆիկ. Քայքայել dUTP պարունակող ԴՆԹ-ի բոլոր բեկորները, այնուհետև կատարել PCR ռեակցիա:Սա կարող է ամբողջությամբ հեռացնել աերոզոլային աղտոտվածությունը, որն առաջացել է PCR արտադրանքներից:Էֆեկտը ներկայացված է ստորև բերված նկարում.

Նշում. Ուղղակի PCR շարքի համար կարող եք ընտրել FJ Biotech-ի հակաPCR արտադրանքի աղտոտման համակարգի սերիական արտադրանքները:

Առաջարկել

Լաբորատորիաների համար, որոնք իրականացնում են լայնածավալ գենոտիպային փորձարկումներ, խստորեն խորհուրդ է տրվում օգտագործել UNG հակա-PCR արտադրանքի աղտոտման համակարգը ռեակտիվների փորձարկման համար՝ ի լրումն ողջամիտ լաբորատորիաների կառուցման:

Հիշեցում. այս համակարգի օգտագործումը չի կարող հեռացնել PCR արտադրանքի աղտոտումը, որն արդեն առաջացել է:Հետևաբար, UNG համակարգը պետք է օգտագործվի համապատասխան փորձարկման սկզբում, իսկ UNG համակարգը միշտ պետք է օգտագործվի PCR ուժեղացման համար, որպեսզի կանխվի PCR արտադրանքի աղտոտումը:Կեղծ դրական:

Խորհուրդ է տրվում օգտագործել Forge Biotech-ի Direct PCR-UNG համակարգը լայնածավալ փորձարկումներ իրականացնելիս, ինչպիսիք են՝ Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;

Plant Seed Direct PCR Kit-UNG;

Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG;

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;

Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG:

Foregene-ի հավաքածուների այս շարքը ոչ միայն կարող է արագ և լայնածավալ PCR հայտնաբերում կատարել, այլ նաև արդյունավետորեն կանխել և վերահսկել PCR արտադրանքի աղտոտումը: