PCR մեթոդները և նուկլեինաթթվով աերոզոլային աղտոտումը նուկլեինաթթուների փորձարկման լաբորատորիաներում նման են մետաղադրամի երկու կողմերին:Մենք կարող ենք ընտրել միայն ունենալ, թե ոչ, բայց չենք կարող ընտրել՝ ուզենք, թե ծախսենք:

1. ԴՆԹ հեռացնողի սկրինինգ

Նուկլեինաթթվային աերոզոլային աղտոտվածության տարածական հեռացմանը հասնելու համար նախ անհրաժեշտ է ստուգել ԴՆԹ հեռացնող սարքերը, որոնք կարող են հեռացնել նուկլեինաթթուները հեղուկ վիճակում:Քանի որ չկան շատ ԴՆԹ հեռացնող միջոցներ, որոնք իսկապես աշխատում են:Փորձարարական մեթոդի համար դիմեք. ԴՆԹ հեռացնող միջոցը չի կարող լինել լաբորատորիայի «գաղտնի անկյուն»:

Այս փորձի ժամանակ թվային PCR-ով քանակականացված ASFV պլազմիդի և ԴՆԹ հեռացնողի 100 օրինակ/μL (CT մոտավորապես 31) խառնվել են հավասար ծավալներով, այնուհետև արձագանքել են սենյակային ջերմաստիճանում համապատասխանաբար 10 րոպե, 20 րոպե և 30 րոպե:Նուկլեինաթթվի արդյունահանումից հետո իրականացվել է qPCR ուժեղացում:Համեմատվել է պլազմիդի և ջրի հետ խառնված դրական հսկողություն:Քանի որ փորձը չի ավարտվել միաժամանակ, արդյունքների միջև կարող է լինել որոշակի շեղում, բայց դա չի ազդում փորձի ավարտի վրա։Մինչ այժմ ես գնահատել եմ ԴՆԹ հեռացնող 10 կոմերցիոն արտադրանք:Միայն No1, No6 և No8 արտադրանքները կարող են արդյունավետորեն քայքայել պլազմիդի ԴՆԹ-ն հեղուկ վիճակում։Այլ ապրանքներ գրեթե ոչ մի ազդեցություն չունեն:

Աղյուսակ 1 Առևտրային հասանելի ԴՆԹ հեռացնող միջոցի նուկլեինաթթվի հեռացման ազդեցությունը

2. Սովորաբար օգտագործվող ախտահանիչների ԴՆԹ-ի հեռացման էֆեկտի փորձը

1. Սովորաբար օգտագործվող ախտահանիչ միջոցների զննում

Լաբորատորիաներում սովորաբար օգտագործվում են ախտահանիչների բազմաթիվ տեսակներ՝ ալդեհիդներ, ֆենոլներ, սպիրտներ, չորրորդական ամոնիումի աղեր, պերօքսիդներ, քլորի պատրաստուկներ և թթուներ և հիմքեր:Այս ախտահանիչ միջոցների ախտահանիչ ազդեցությունը միկրոօրգանիզմների վրա լիովին ստուգվել է փորձերի միջոցով, սակայն նուկլեինաթթուների քայքայման ազդեցության վերաբերյալ բավարար փորձնական տվյալներ չկան:Նուկլեինաթթվի փորձարկման լաբորատորիաներին անհրաժեշտ է ախտահանիչ, որը ոչ միայն լավ ախտահանիչ ազդեցություն ունի միկրոօրգանիզմների վրա, այլև կարող է քայքայել ԴՆԹ-ն:Փորձարկման արդյունքները ցույց են տալիս, որ միայն երկու քլորային պատրաստուկներ՝ 84 ախտահանիչ և տրիքլորիզոցիանուրաթթվի և 1 M աղաթթվի, համապատասխանում են պահանջներին:Քանի որ 1 M աղաթթուն շատ քայքայիչ է, խորհուրդ է տրվում, որ քլորի պատրաստուկներն օգտագործվեն որպես թափոններ նուկլեինաթթվի փորձարկման լաբորատորիաներում:Այնուամենայնիվ, քլորի պատրաստուկները քայքայիչ են մետաղների համար և չեն կարող օգտագործվել գործիքների և սարքավորումների ախտահանման համար:

Աղյուսակ 2 Տարբեր տեսակի ախտահանիչների ԴՆԹ-ի հեռացման ազդեցությունները

2. Քլորի պատրաստուկների նվազագույն արդյունավետ կոնցենտրացիան

Քլորի վրա հիմնված ախտահանիչները ԴՆԹ-ի քայքայման ուժեղ ազդեցություն ունեն, սակայն մետաղի քայքայիչ և գրգռվածության պատճառով դրանք կարող են օգտագործվել հատակը, ոչ մետաղական սալիկների, ներծծող ծայրերը, ցենտրիֆուգային խողովակները և այլ փորձարկման առարկաները մաքրելու համար:

Համաձայն «Նոր կորոնար թոքաբորբի համաճարակի ախտահանման տեխնիկական ուղեցույցի»՝ աղտոտիչներ (հիվանդների արյուն, սեկրեցներ և փսխում) մատչելի քլոր 5գ/Լ-10գ/Լ քլոր պարունակող ախտահանիչ;հատակները, պատերը և առարկաների մակերեսները օգտագործում են հասանելի քլոր 1գ/լ Քլորային ախտահանիչ. հագուստը, անկողնային պարագաները և այլ գործվածքները սկզբում 30 րոպե թրջում են քլորային ախտահանիչով 0,5 գ/լ հասանելի քլորով, այնուհետև մաքրվում են սովորականի պես:

Աղյուսակ 3 Քլորի ախտահանիչի տարբեր կոնցենտրացիաների ԴՆԹ-ի հեռացման ազդեցությունը

Փորձարկման արդյունքները ցույց են տալիս, որ երբ քլորի արդյունավետ կոնցենտրացիան ավելի կամ հավասար է 1,2 գ/լ-ի, քլոր պարունակող ախտահանիչը կարող է ամբողջությամբ քայքայել 100 օրինակ/մլ պլազմիդը, երբ այն օգտագործվում է 5 րոպե:10 րոպե գործողության ժամանակ 84 ախտահանիչը 0,6 գ/լ-ից ավելի կամ հավասար արդյունավետ քլորի կոնցենտրացիայով կարող է ամբողջությամբ քայքայել պլազմիդների 100 օրինակ/մլ:

3. Նուկլեինաթթվի աերոզոլով աղտոտված օդի հեռացման փորձ

Ինչպե՞ս մաքրել նուկլեինաթթուների աերոզոլներով աղտոտված օդը:Մտքերի մեծ մասը ուղղված է աերոզոլով աղտոտված միջավայր ստեղծելուն, այնուհետև այն մաքրելուն, կամ աղտոտվելուց հետո նուկլեինաթթուների մաքրմանը:Ինձ համար անիմաստ է այն փորձը, որը չի կարող կրկնվել, և փորձի արդյունքները չեն կարող քանակապես վերլուծվել, ուստի ես փոխառեցի ախտահանիչ օդի ախտահանման որոշ մեթոդներ:Տես «GB27948-2020 Ընդհանուր պահանջներ օդի ախտահանիչներին» և «Ախտահանման տեխնիկական բնութագրերը»

1. Փորձարկման նյութեր

1.1 ԴՆԹ հեռացնող միջոց. Այս փորձի ժամանակ ընտրվել են աղյուսակ 1-ում առևտրային առումով հասանելի երկու ԴՆԹ հեռացնող 6 և 8:

1.2 Փորձնական պլազմիդ. Հաշվի առնելով, որ լաբորատոր աղտոտվածության մեծ մասի CT արժեքը կլինի 30-ից բարձր, այս անգամ օգտագործված ASFV գենային պլազմիդի կոնցենտրացիան կազմում է մոտ 100 օրինակ/μL, իսկ լյումինեսցենտային քանակական PCR CT-ն մոտ 31,07 է:Ավելացրեք պլազմիդը լցված բամբակյա շվաբրին և չորացրեք օդում:

1.3 Փորձարկման գործիք. Bilingkehan KVBOX ախտահանման գործիքը, որը սիրով աջակցվում է Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd.-ի կողմից, ունի օդի ախտահանման գերազանց կատարում ջրածնի պերօքսիդով ախտահանիչով և կարող է արդյունավետորեն սպանել սպորները և այլ միկրոօրգանիզմներ:

1.4 Փորձարկման տարածք՝ մոտ 0,1 խորանարդ մետր ծավալով փակ փոխանցման պատուհան:

2. Փորձարկման մեթոդ

Ախտահանման մեքենայի վրա դրված ախտահանիչ նյութի քանակը 10 մլ է, իսկ կոնցենտրացիան՝ 100 մլ/մ3, ինչը շատ ավելին է, քան «Օդը ախտահանող միջոցների համար GB27948-2020 ընդհանուր պահանջները». աերոզոլային ցողացիրով ախտահանում օգտագործելիս ախտահանիչի քանակը պետք է լինի ≤10 մլ/մ3։