Հակամարմինները, որոնք նաև կոչվում են իմունոգոլոբուլիններ (Ig), գլիկոպրոտեիններ են, որոնք հատուկ կապվում են անտիգենների հետ:
Սովորական հակամարմինների պատրաստումը արտադրվում է կենդանիների իմունիզացիայի և հակաշիճուկի հավաքման միջոցով:Հետևաբար, հակաշիճուկը սովորաբար պարունակում է հակամարմիններ այլ անկապ անտիգենների և շիճուկի այլ սպիտակուցային բաղադրիչների դեմ:Ընդհանուր հակագենի մոլեկուլները հիմնականում պարունակում են բազմաթիվ տարբեր էպիտոպներ, ուստի սովորական հակամարմինները նաև հակամարմինների խառնուրդ են բազմաթիվ տարբեր էպիտոպների դեմ:Նույնիսկ սովորական շիճուկային հակամարմինները, որոնք ուղղված են նույն էպիտոպի դեմ, դեռևս կազմված են տարասեռ հակամարմիններից, որոնք արտադրվում են տարբեր B բջիջների կլոնների կողմից:Ուստի սովորական շիճուկային հակամարմինները կոչվում են նաև պոլիկլոնալ հակամարմիններ կամ կարճ՝ պոլիկլոնալ հակամարմիններ։
Մոնոկլոնալ հակամարմինը (մոնոկլոնալ հակամարմին) խիստ միատեսակ հակամարմին է, որը արտադրվում է մեկ B բջջային կլոնի կողմից և ուղղված է միայն կոնկրետ էպիտոպի դեմ:Այն սովորաբար պատրաստվում է հիբրիդոմայի տեխնոլոգիայով. հիբրիդոմայի հակամարմինների տեխնոլոգիան հիմնված է բջիջների միաձուլման տեխնոլոգիայի վրա՝ համատեղելով B բջիջները հատուկ հակամարմիններ և միելոմայի բջիջները՝ անսահման աճի կարողությամբ արտազատելու ունակությամբ, B-բջիջների հիբրիդոմաների մեջ:Այս հիբրիդոմային բջիջը ունի ծնողական բջիջի բնութագրերը:Այն կարող է անվերջ և անմահորեն բազմանալ in vitro-ում, ինչպես միելոմայի բջիջները, և կարող է սինթեզել և արտազատել հատուկ հակամարմիններ, ինչպիսիք են փայծաղի լիմֆոցիտները:Կլոնավորման միջոցով կարելի է ձեռք բերել մեկ հիբրիդոմային բջիջից ստացված մոնոկլոնալ գիծ, այսինքն՝ հիբրիդոմա բջջային գիծ։Նրա արտադրած հակամարմինները բարձր համասեռ հակամարմիններ են նույն հակագենային որոշիչի, այսինքն՝ մոնոկլոնալ հակամարմինների դեմ։
Հակամարմինները գոյություն ունեն որպես մեկ կամ մի քանի Y-աձև մոնոմերներ (այսինքն՝ մոնոկլոնալ հակամարմիններ կամ պոլիկլոնալ հակամարմիններ):Յուրաքանչյուր Y-աձև մոնոմեր կազմված է 4 պոլիպեպտիդային շղթաներից՝ ներառյալ երկու նույնական ծանր շղթաները և երկու նույնական թեթև շղթաները:Թեթև և ծանր շղթաները անվանվում են ըստ իրենց մոլեկուլային քաշի։Y-աձև կառուցվածքի վերին մասը փոփոխական շրջանն է, որը հանդիսանում է հակագենը կապող տեղամաս:(Հատված Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept-ից)
Հակամարմինների կառուցվածքը
Ծանր շղթա
Գոյություն ունեն կաթնասունների Ig ծանր շղթաների հինգ տեսակ, որոնք կոչվում են հունարեն α, δ, ε, γ և μ տառերով։Համապատասխան հակամարմինները կոչվում են IgA, IgD, IgE, IgG և IgM:Տարբեր ծանր շղթաները տարբերվում են չափերով և կազմով:α-ն և γ-ը պարունակում են մոտավորապես 450 ամինաթթու, մինչդեռ μ-ն ու ε-ն պարունակում են մոտավորապես 550 ամինաթթու:
Յուրաքանչյուր ծանր շղթա ունի երկու շրջան՝ հաստատուն շրջան և փոփոխական շրջան։Նույն տեսակի բոլոր հակամարմիններն ունեն նույն հաստատուն շրջանը, սակայն տարբեր տեսակի հակամարմինների միջև կան տարբերություններ:Ծանր շղթաների γ, α և δ-ի մշտական շրջանները կազմված են երեք Ig տիրույթներից իրար հաջորդող, որոնց ճկունությունը մեծացնելու համար կրունկի շրջանով;Մ և ε ծանր շղթաների հաստատուն շրջանները կազմված են 4 Ig տիրույթներից։Տարբեր B բջիջների կողմից արտադրված հակամարմինների ծանր շղթայի փոփոխական շրջանը տարբեր է, բայց նույն B բջիջի կամ բջջային կլոնի կողմից արտադրված հակամարմինի փոփոխական շրջանը նույնն է, և յուրաքանչյուր ծանր շղթայի փոփոխական շրջանը մոտ 110 ամինաթթու երկարություն ունի:, Եվ ձևավորեք մեկ Ig տիրույթ:
Թեթև շղթա
Կաթնասունների մեջ կան միայն երկու տեսակի թեթև շղթաներ՝ լամբդա և կապպա տեսակ։Յուրաքանչյուր թեթև շղթա ունի երկու կապակցված տիրույթ՝ հաստատուն տարածաշրջան և փոփոխական շրջան:Թեթև շղթայի երկարությունը կազմում է մոտ 211~217 ամինաթթու։Յուրաքանչյուր հակամարմինում պարունակվող երկու թեթեւ շղթաները միշտ նույնն են։Կաթնասունների համար յուրաքանչյուր հակամարմինի թեթև շղթան ունի միայն մեկ տեսակ՝ կապպա կամ լամբդա:Որոշ ստորին ողնաշարավորների մոտ, ինչպիսիք են աճառային ձկները (աճառաձկներ) և ոսկրային ձկները, հայտնաբերվում են նաև թեթև շղթաների այլ տեսակներ, ինչպիսիք են իոտա (իոտա) տիպը:
Fab և Fc հատվածներ
Fc հատվածը կարող է ուղղակիորեն համակցվել ֆերմենտների կամ լյումինեսցենտային ներկերի հետ՝ հակամարմինները պիտակավորելու համար:Դա այն հատվածն է, որտեղ հակամարմինները պտտվում են ափսեի վրա ELISA գործընթացի ժամանակ, և այն նաև այն հատվածն է, որտեղ երկրորդ հակամարմինը ճանաչվում և կապվում է իմունային նստվածքի, իմունոբլոտինգի և իմունոհիստոքիմիայի միջոցով:Հակամարմինները կարող են հիդրոլիզացվել երկու F(ab) սեգմենտների և մեկ Fc հատվածի պրոտեոլիտիկ ֆերմենտների միջոցով, ինչպիսիք են պապաինը, կամ դրանք կարող են կոտրվել կրունկի շրջանից պեպսինի միջոցով և հիդրոլիզացվել մեկ F(ab)2 հատվածի և մեկ Fc հատվածի:IgG հակամարմինների բեկորները երբեմն շատ օգտակար են:Fc հատվածի բացակայության պատճառով F(ab) հատվածը չի նստում հակագենի հետ, ոչ էլ այն չի գրավվի իմունային բջիջների կողմից in vivo հետազոտություններում:Փոքր մոլեկուլային բեկորների և խաչաձև կապող ֆունկցիայի բացակայության պատճառով (Fc հատվածի բացակայության պատճառով), Fab հատվածը սովորաբար օգտագործվում է ֆունկցիոնալ հետազոտություններում ռադիոպիտակավորման համար, իսկ Fc հատվածը հիմնականում օգտագործվում է որպես արգելափակող նյութ հիստոքիմիական ներկման ժամանակ:
Փոփոխական և հաստատուն շրջաններ
Փոփոխական շրջանը (V շրջան) գտնվում է H շղթայի 1/5 կամ 1/4 (պարունակում է մոտ 118 ամինաթթու մնացորդներ)՝ N-վերնամասի մոտ և 1/2 (պարունակում է մոտ 108-111 ամինաթթուների մնացորդներ) L շղթայի N վերջնակետի մոտ:Յուրաքանչյուր V շրջան ունի պեպտիդային օղակ, որը ձևավորվում է ներշղթայական դիսուլֆիդային կապերով, և յուրաքանչյուր պեպտիդային օղակ պարունակում է մոտավորապես 67-75 ամինաթթուների մնացորդներ:V տարածաշրջանում ամինաթթուների բաղադրությունը և դասավորությունը որոշում են հակամարմինների հակագենային կապի առանձնահատկությունը:Շնորհիվ V տարածաշրջանում ամինաթթուների անընդհատ փոփոխվող տեսակների և հաջորդականության, կարող են ձևավորվել բազմաթիվ տեսակի հակամարմիններ՝ տարբեր կապող հակագենային առանձնահատկություններով:L շղթայի և H շղթայի V շրջանները կոչվում են համապատասխանաբար VL և VH։VL-ում և VH-ում որոշ տեղական շրջանների ամինաթթուների բաղադրությունը և հաջորդականությունը տատանումների ավելի բարձր աստիճան ունեն:Այս շրջանները կոչվում են հիպերփոփոխական շրջաններ (HVR):Ամինաթթուների կազմը և ոչ HVR մասերի դասավորությունը V շրջանում համեմատաբար պահպանողական են, որը կոչվում է շրջանակային շրջան։VL-ում կան երեք հիպերփոփոխական շրջաններ, որոնք սովորաբար տեղակայված են համապատասխանաբար 24-ից 34 և 89-ից 97 ամինաթթուների մնացորդներում:VL-ի և VH-ի երեք HVR-ները կոչվում են համապատասխանաբար HVR1, HVR2 և HVR3:Ռենտգենյան բյուրեղների դիֆրակցիայի հետազոտությունը և վերլուծությունը ապացուցեցին, որ հիպերփոփոխական շրջանը իսկապես այն տեղն է, որտեղ հակամարմինների հակագենը կապվում է, ուստի այն կոչվում է կոմպլեմենտարությունը որոշող շրջան (CDR):VL-ի և VH-ի HVR1, HVR2 և HVR3-ը կարելի է անվանել համապատասխանաբար CDR1, CDR2 և CDR3:Ընդհանուր առմամբ, CDR3-ն ունի հիպերփոփոխականության ավելի բարձր աստիճան:Հիպերփոփոխական շրջանը նաև այն հիմնական տեղանքն է, որտեղ գոյություն ունեն Ig մոլեկուլների իդիոտիպային որոշիչները:Շատ դեպքերում H շղթան ավելի կարևոր դեր է խաղում անտիգենին կապելու գործում:
Մշտական շրջան (C շրջան)գտնվում է H շղթայի 3/4 կամ 4/5 (մոտավորապես 119 ամինաթթուից մինչև C տերմինալ) 3/4 կամ 4/5 հատվածում, C տերմինալի մոտ և 1/2 (պարունակում է մոտ 105 ամինաթթու մնացորդ) L շղթայի C վերջնակետի մոտ։H շղթայի յուրաքանչյուր ֆունկցիոնալ շրջան պարունակում է մոտ 110 ամինաթթուների մնացորդներ և պարունակում է պեպտիդային օղակ՝ կազմված 50-60 ամինաթթուների մնացորդներից, որոնք կապված են դիսուլֆիդային կապերով։Այս շրջանի ամինաթթուների կազմը և դասավորությունը համեմատաբար հաստատուն են նույն կենդանական Ig իզոտիպի L շղթայում և նույն տեսակի H շղթայում:Նույնը, այն կարող է միայն հատուկ կապվել համապատասխան անտիգենին, բայց նրա C շրջանի կառուցվածքը նույնն է, այսինքն՝ ունի նույն հակագենիկությունը։Ձիու հակամարդու IgG երկրորդական հակամարմինը (կամ հակահակամարմինը) կարող է համակցվել երկու հակամարմինների (IgG) հետ:Սա կարևոր հիմք է երկրորդական հակամարմինների պատրաստման և ֆլուորեսցեինի, իզոտոպների, ֆերմենտների և այլ պիտակավորված հակամարմինների կիրառման համար:
Առնչվող ապրանքներ.
Cell Direct RT-qPCR հավաքածու
Հրապարակման ժամանակը՝ Sep-30-2021