Animal Total RNA Isolation Kit Ընդհանուր ՌՆԹ-ի արդյունահանման և մաքրման հավաքածուներ կենդանիների հյուսվածքների և բջիջների համար
Հավաքածուի նկարագրություն.
Արագ և արդյունավետ կերպով արդյունահանեք բարձր մաքրության և բարձրորակ ընդհանուր ՌՆԹ տարբեր կենդանիների հյուսվածքներից:
Պետք չէ անհանգստանալ ՌՆԹ-ի քայքայման մասին:Ամբողջ համակարգը RNase-Free է
Արդյունավետ հեռացրեք ԴՆԹ-ն՝ օգտագործելով ԴՆԹ մաքրող սյունակ
Հեռացրեք ԴՆԹ-ն՝ առանց DNase ավելացնելու
Պարզ. բոլոր գործողությունները կատարվում են սենյակային ջերմաստիճանում
Արագ - գործողությունը կարող է ավարտվել 30 րոպեում
Անվտանգ. օրգանական ռեակտիվ չի օգտագործվում
Բարձր մաքրություն-OD260/280≈1.8-2.1
Կոմպլեկտների նկարագրություններ
50 Preps, 200 Preps
Այս հավաքածուն օգտագործում էպտտվող սյունակ և բանաձևմշակվել է մեր ընկերության կողմից, որը կարող է կենդանական տարբեր հյուսվածքներից բարձր արդյունավետությամբ արդյունահանել բարձր մաքրության և բարձրորակ ընդհանուր ՌՆԹ: Այն ապահովում է արդյունավետ ԴՆԹ մաքրող սյուն, որը հեշտությամբ կարող է առանձնացնել և ներծծել գենոմային ԴՆԹ-ն գերտնից և հյուսվածքների լիզատից, պարզ և ժամանակ խնայող:Միայն ՌՆԹ-ով Սյունակը կարող է արդյունավետորեն կապել ՌՆԹ-ն և կարող է միաժամանակ մշակվել եզակի բանաձևով Շատ նմուշներ:
Ամբողջ համակարգը RNase-Free է, որպեսզի արդյունահանված ՌՆԹ-ն չքայքայվի;Բուֆերային RW1, բուֆերային RW2 բուֆերային լվացման համակարգ, որպեսզի ստացված ՌՆԹ-ն զերծ լինի սպիտակուցից, ԴՆԹ-ից, իոններից և օրգանական միացություններից աղտոտվածությունից։
Հավաքածուի բաղադրիչներ
| Կենդանիների ընդհանուր ՌՆԹ-ի մեկուսացման հավաքածու | ||
| Հավաքածուի բաղադրիչներ | ՌԵ-03011 | ՌԵ-03014 |
| 50 Տ | 200 Տ | |
| Բուֆեր RL1* | 25 մլ | 100 մլ |
| Բուֆեր RL2 | 15 մլ | 60 մլ |
| Բուֆեր RW1* | 25 մլ | 100 մլ |
| Բուֆեր RW2 | 24 մլ | 96 մլ |
| ՌՆազազերծ ddH2O | 10 մլ | 40 մլ |
| Միայն ՌՆԹ-ի սյունակ | 50 | 200 թ |
| ԴՆԹ-մաքրման սյունակ | 50 | 200 թ |
| Հրահանգների ձեռնարկ | 1 հատ | 1 հատ |
Ապրանքի մասին տեղեկատվություն
| Ձևաչափ | Պտտվող սյունակ | Մաքրման բաղադրիչ | Foregene սյունակ, ռեագենտ |
| Հոսք | 1-24 նմուշ | Նախապատրաստման ժամանակ | ~ 30 րոպե (24 նմուշ) |
| Ցենտրիֆուգ | Գրասեղանի ցենտրիֆուգ | Պիրոլիզային տարանջատում | Կենտրոնախույս տարանջատում |
| Նմուշ | Կենդանական հյուսվածք;բջիջ | Նմուշների քանակը | Հյուսվածք՝ 10-20 մգ;Բջջ:(1-5)×106 |
| Էլյուցիայի ծավալը | 50-200 մլ | Բեռնման առավելագույն ծավալը | 850 մլ |
Առանձնահատկություններ և առավելություններ
■ Կարիք չկա անհանգստանալու ՌՆԹ-ի քայքայման մասին;ամբողջ համակարգը RNase-Free է
■ Արդյունավետ հեռացրեք ԴՆԹ օգտագործող ԴՆԹ մաքրող սյունակը
■ Հեռացրեք ԴՆԹ-ն՝ առանց DNase ավելացնելու
■ Պարզ-բոլոր գործողություններն ավարտվում են սենյակային ջերմաստիճանում
■ Արագ գործարկումը կարող է ավարտվել 30 րոպեում
■ Անվտանգ, օրգանական ռեակտիվ չի պահանջվում
■ Բարձր մաքրություն -OD260/280≈1.8-2.1
Կոմպլեկտի հավելված
Այն հարմար է մի շարք թարմ կամ սառեցված կենդանիների հյուսվածքներից կամ մշակված բջիջներից ընդհանուր ՌՆԹ-ի արդյունահանման և մաքրման համար:
Ապրանքի պարամետրերը
■ Ներքևի կիրառումներ՝ առաջին շղթայի cDNA սինթեզ, RT-PCR, մոլեկուլային կլոնավորում, Հյուսիսային բլոտ և այլն:
■ Նմուշներ՝ կենդանիների հյուսվածքներ, կուլտիվացված բջիջներ
■ Դոզան՝ հյուսվածքներ 10-20մգ, Բջջային (2-5)×106
■ Մաքրման սյունակի ԴՆԹ-ի միացման առավելագույն հզորությունը՝ 80 մկգ
■ Էլյուզի ծավալը՝ 50-200 մկլ
Դիագրամ
Animal Total RNA Isolation Kit բուժված 20 մգ
Մկնիկի թարմ նմուշներ, վերցրեք 5% մաքրված ընդհանուր ՌՆԹ 1% ագար
Գլիկոգելային էլեկտրոֆորեզ
1: Փայծաղ 2. Երիկամ
3. լյարդ 4. սիրտ
Պահպանման և պահպանման ժամկետը
Հավաքածուն կարող է պահվել 24 ամիս սենյակային ջերմաստիճանում (15–25 ℃) կամ 2–8 ℃ ավելի երկար ժամանակ։Բուֆեր RL1-ը կարող է պահվել 4℃ ջերմաստիճանում 1 ամիս՝ β-մերկապտոէթանոլ ավելացնելուց հետո (ըստ ցանկության):
Մեջբերված հոդվածներ
1.IF: 18.808:Zheng, Q., Qin, F., Luo, R., et al.mRNA-ով բեռնված լիպիդային նանոմասնիկներ՝ լյարդի բազայի խմբագրման համար՝ կենտրոնական կոմպոզիտային դիզայնի օպտիմալացման միջոցով:Adv.Գործառույթ.Մատեր.2021, 31, 2011068.doi:10.1002/adfm.202011068.
2.IF: 18.187:He X, Hong W, Yang J, et al.Թերապևտիկ ցողունային բջիջների պատրաստման մեջ բջիջների ինքնաբուխ ապոպտոզը իմունոմոդուլացնող ազդեցություն է ունենում ֆոսֆատիդիլսերինի արտազատման միջոցով:Ազդանշանի հաղորդիչի թիրախը Ther.2021 հուլիսի 14; 6 (1): 270.doi՝ 10.1038/s41392-021-00688-z.
3.ԵԹԵ:17.97:Dai Z, Liu H, Liao J, et al.N7-Methylguanosine tRNA մոդիֆիկացիան ուժեղացնում է օնկոգեն mRNA-ի թարգմանությունը և նպաստում ներլյարդային խոլանգիոկարցինոմայի առաջընթացին:Մոլ Բջջ.2021 հուլիսի 29:S1097-2765(21)00555-4.doi՝ 10.1016/j.molcel.2021.07.003.
4.IF: 9.225Cao X, Shu Y, Chen Y և այլն:Mettl14-Միջնորդված m6A փոփոխությունը հեշտացնում է լյարդի վերածնումը՝ պահպանելով էնդոպլազմային ցանցի հոմեոստազը:Cell Mol Gastroenterol Hepatol.2021; 12 (2): 633-651:doi՝ 10.1016/j.jcmgh.2021.04.001.
ՌՆԹ-ի մեկուսացման հավաքածուներ համար նմուշի այլ աղբյուրներհասանելի են:
Բջջային, բույս, վիրուսային, արյուն և այլն:
ՌՆԹ-ն չի արդյունահանվում կամ ՌՆԹ-ի ելքը ցածր է
Հաճախ կան մի շարք գործոններ, որոնք ազդում են վերականգնման արդյունավետության վրա, ինչպիսիք են՝ հյուսվածքների նմուշի ՌՆԹ-ի պարունակությունը, գործողության եղանակը, լուծույթի ծավալը և այլն:
1. Գործողության ընթացքում կատարվել է սառցե լոգանք կամ կրիոգեն (4 °C) ցենտրիֆուգացիա:
Առաջարկություն. Աշխատեք սենյակային ջերմաստիճանում (15-25°C) ողջ գործընթացի ընթացքում, մի սառույցով լոգանք մի արեք և ցածր ջերմաստիճանում ցենտրիֆուգեք:
2. Նմուշի ոչ պատշաճ պահպանում կամ նմուշների պահպանման չափազանց մեծ ժամանակ:
Առաջարկություն. Նմուշները պահել -80 °C ջերմաստիճանում կամ սառեցնել հեղուկ ազոտի մեջ և խուսափել սառեցման և հալեցման կրկնակի օգտագործումից:փորձեք օգտագործել թարմ հյուսվածք կամ մշակված բջիջներ ՌՆԹ-ի արդյունահանման համար:
3. Անբավարար նմուշի լիզ:
Առաջարկություն. Հյուսվածքը միատարրացնելիս համոզվեք, որ հյուսվածքը բավականաչափ համասեռացված է, և որ հյուսվածքային բջիջները բավականաչափ պառակտված են՝ բացատրելու ՌՆԹ-ի արտազատումը:
4. Էլյուենտը ճիշտ չի ավելացվել։
Առաջարկություն. Հաստատեք, որ RNase-Free ddH2O-ն ավելացվում է կաթիլ-կաթիլային մաքրման սյունակի թաղանթի մեջտեղում:
5. Բացարձակ էթանոլի ճիշտ ծավալը չի ավելացվել Buffer RL2-ին կամ Buffer RW2-ին:
Առաջարկություն. Հետևեք հրահանգներին, ավելացրեք բացարձակ էթանոլի ճիշտ ծավալը Buffer RL2 և Buffer RW2 և լավ խառնեք նախքան հավաքածուն օգտագործելը:
6. Հյուսվածքի նմուշի չափաբաժինը տեղին չէ:
Առաջարկություն. Օգտագործեք 10-20 մգ հյուսվածք կամ (1-5) × 106բջիջները մեկ 500 μl բուֆերային RL1-ի համար, քանի որ հյուսվածքների չափազանց մեծ օգտագործումը կարող է հանգեցնել ՌՆԹ-ի արդյունահանման կրճատման:
7. Սխալ զտման ծավալը կամ թերի էլյուցիան:
Առաջարկություն. Մաքրման սյունակի արտանետման ծավալը 50-200 մկլ է;եթե էլյուցիոն էֆեկտը գոհացուցիչ չէ, խորհուրդ է տրվում երկարացնել սենյակային ջերմաստիճանի տեղադրման ժամանակը նախապես տաքացված RNase-Free ddH ավելացնելուց հետո:2O, օրինակ՝ 5-10 րոպե:
8. Մաքրման սյունակն ունի էթանոլի մնացորդ բուֆերային RW2 լվացումից հետո:
Առաջարկություն. Եթե բուֆերային RW2 լվացումից հետո էթանոլի մնացորդ կա, դատարկ խողովակի ցենտրիֆուգումը 1 րոպեով, դատարկ խողովակի ցենտրիֆուգման գործողության ժամանակը կարող է ավելացվել մինչև 2 րոպե, կամ մաքրման սյունը կարող է տեղադրվել սենյակային ջերմաստիճանում 5 րոպե՝ մնացորդային էթանոլը պատշաճ կերպով հեռացնելու համար:
Մաքրված ՌՆԹ-ն քայքայվում է
Մաքրված ՌՆԹ-ի որակը կապված է այնպիսի գործոնների հետ, ինչպիսիք են նմուշի պահպանումը, RNase-ի աղտոտումը և մանիպուլյացիան և այլն:
1. Հյուսվածքների նմուշները ժամանակին չեն պահվում։
Առաջարկություն. Եթե հյուսվածքների նմուշները կամ բջիջները հավաքագրելուց հետո ժամանակին չեն օգտագործվում, անմիջապես կրիոպահպանեք -80 °C կամ հեղուկ ազոտով:ՌՆԹ-ի արդյունահանման համար հնարավորության դեպքում օգտագործեք նոր վերցված հյուսվածք կամ բջիջ:
2. Հյուսվածքների նմուշների կրկնվող սառեցում-հալեցում:
Առաջարկություն. Հյուսվածքների նմուշները պահելու ժամանակ ավելի լավ է դրանք փոքր կտորների կտրել պահպանման համար, իսկ դրանց օգտագործման ժամանակ հեռացնել դրանցից մեկը՝ նմուշի կրկնվող սառեցումից-հալեցումից և ՌՆԹ-ի քայքայումից խուսափելու համար:
3. Վիրահատության ընթացքում RNase ներմուծված է կամ չկրելով միանգամյա օգտագործման ձեռնոցներ, դիմակներ և այլն:
Առաջարկություն. ՌՆԹ արդյունահանման փորձերը լավագույնս կատարվում են ՌՆԹ-ի մանիպուլյացիայի առանձին սենյակներում, և աղյուսակը մաքրվում է փորձից առաջ:
Փորձի ընթացքում կրեք միանգամյա օգտագործման ձեռնոցներ և դիմակներ, որպեսզի նվազագույնի հասցնեք ՌՆԹ-ի քայքայումը, որն առաջանում է RNase-ի ներդրմամբ:
4. Օգտագործման ընթացքում ռեակտիվները աղտոտվում են RNase-ով:
Առաջարկություն. Փոխարինեք նոր Կենդանիների ընդհանուր ՌՆԹ-ի մեկուսացման հավաքածուով համապատասխան փորձերի համար:
5. ՌՆԹ մանիպուլյացիայի ժամանակ օգտագործվող ցենտրիֆուգային խողովակները, ծայրերը և այլն, աղտոտված են RNase-ով:
Առաջարկություն. Հաստատեք, որ ցենտրիֆուգային խողովակները, ծայրերը, պիպետները և այլն, որոնք օգտագործվում են ՌՆԹ-ի արդյունահանման համար, բոլորը RNase-ից զերծ են:
Մաքրված ստացված ՌՆԹ-ն ազդում է ներքևում գտնվող փորձերի վրա
Մաքրման սյունակով մաքրված ՌՆԹ-ն, եթե աղի իոնները, սպիտակուցի պարունակությունը չափազանց մեծ է, կազդի ներքևի փորձի վրա, ինչպիսիք են՝ հակադարձ տառադարձումը, Հյուսիսային Բլոտ և այլն:
1. Էլյուացված ՌՆԹ-ն ունի աղի իոնների մնացորդներ:
Առաջարկություն. Հաստատեք, որ էթանոլի ճիշտ ծավալը ավելացվել է Buffer RW2-ին և կատարեք 2 մաքրման սյունակի լվացում շահագործման համար նշված կենտրոնախույս արագությամբ.եթե կա աղի իոնների մնացորդ, ապա մաքրման սյունը թողեք բուֆերային RW2 5 րոպե սենյակային ջերմաստիճանում և կատարեք ցենտրիֆուգում՝ աղի աղտոտումը առավելագույնի հասցնելու համար:
2. Էթանոլի մնացորդը զտված ՌՆԹ-ում:
Առաջարկություն. Հաստատեք, որ RW2 բուֆերային լվացումից հետո դատարկ խողովակի ցենտրիֆուգման գործողությունը կատարեք շահագործման համար նշված ցենտրիֆուգման արագությամբ, ավելացրեք դատարկ խողովակի ցենտրիֆուգման գործողության ժամանակը մինչև 2 րոպե, եթե դեռ կա էթանոլի մնացորդ, կամ թողեք սենյակային ջերմաստիճանում 5 րոպե դատարկ խողովակի նորից ցենտրիֆուգումից հետո՝ առավելագույնի հասցնելու համար:
