Կազմակերպությունը շարունակում է ընթացակարգի հայեցակարգը «գիտական ​​կառավարում, բարձր որակ և արդյունավետություն առաջնահերթություն, գնորդ գերագույն Չինաստանի համար Manufacturer for 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U.
Կազմակերպությունը պահպանում է ընթացակարգային հայեցակարգը «գիտական ​​կառավարում, բարձր որակի և արդյունավետության առաջնահերթություն, գնորդների գերակայություն.China Taq DNA պոլիմերազ և Qpcr, Մեր ընկերությունն ունի առատ ուժ և ունի կայուն և կատարյալ վաճառքի ցանցային համակարգ:Մենք ցանկանում ենք, որ կարողանայինք ամուր գործարար հարաբերություններ հաստատել տնից և արտերկրից բոլոր հաճախորդների հետ՝ փոխադարձ շահերի հիման վրա:
Իրական ժամանակում PCR պրայմերների նախագծման սկզբունքները

Forward Primer և Reverse Primer

Իրական ժամանակում PCR-ի համար այբբենարանի ձևավորումը շատ կարևոր է:Պրայմերները կապված են PCR ուժեղացման առանձնահատկությունների և արդյունավետության հետ և կարող են նախագծվել հետևյալ սկզբունքներով.

• Այբբենարանի երկարությունը՝ 18-30bp:
• GC պարունակությունը՝ 40-60%:
• Tm արժեքը. Primer նախագծման ծրագրակազմը, ինչպիսին է Primer 5-ը, կարող է տալ այբբենարանի Tm արժեքը:Վերև և ներքև գտնվող այբբենարանների Tm արժեքները պետք է հնարավորինս մոտ լինեն:Կարող է օգտագործվել նաև Tm հաշվարկման բանաձևը՝ Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T):PCR-ն իրականացնելիս որպես եռացման ջերմաստիճան սովորաբար ընտրվում է պրայմերային Tm արժեքից ցածր 5 °C ջերմաստիճան (եռացման ջերմաստիճանի համապատասխան աճը կարող է մեծացնել PCR ռեակցիայի առանձնահատկությունը):
• Պրայմերներ և PCR արտադրանք.

1. Դիզայնի այբբենարան PCR ուժեղացման արտադրանքի երկարությունը նախընտրելի է 100-150 bp:
2. Կաղապարի երկրորդական կառուցվածքային տարածքում նախագծային այբբենարանները պետք է հնարավորինս խուսափել:
3. Խուսափեք 2 կամ ավելի փոխլրացնող հիմքերի ձևավորումից վերև և ներքև գտնվող այբբենարանների 3' ծայրերի միջև:
4. Primer 3′ տերմինալային հիմքը չի կարող առկա լինել 3 լրացուցիչ հաջորդական G կամ C-ով:
5. Պրայմերներն իրենք չեն կարող ունենալ լրացուցիչ կառուցվածքներ, հակառակ դեպքում կձևավորվի մազակալի կառուցվածք, որը կազդի PCR ուժեղացման վրա:
6. ATCG-ն պետք է հնարավորինս հավասարաչափ բաշխվի այբբենարանի հաջորդականությամբ, և 3' տերմինալային հիմքը պետք է խուսափել, քանի որ T.

Հավելված1: Cell DirectRT-qPCR Հավաքածուի բաղադրիչt հավելումների փաթեթ

1.Cell Lysis Solution

 Կազմակերպությունը շարունակում է ընթացակարգի հայեցակարգը «գիտական ​​կառավարում, բարձր որակ և արդյունավետություն առաջնահերթություն, գնորդ գերագույն Չինաստանի համար Manufacturer for 2× Concentrated Premix for Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U.
Չինաստան Արտադրող համարChina Taq DNA պոլիմերազ և Qpcr, Մեր ընկերությունն ունի առատ ուժ և ունի կայուն և կատարյալ վաճառքի ցանցային համակարգ:Մենք ցանկանում ենք, որ կարողանայինք ամուր գործարար հարաբերություններ հաստատել տնից և արտերկրից բոլոր հաճախորդների հետ՝ փոխադարձ շահերի հիման վրա:

Իրական ժամանակում PCR պրայմերների նախագծման սկզբունքները

Forward Primer և Reverse Primer

Իրական ժամանակում PCR-ի համար այբբենարանի ձևավորումը շատ կարևոր է:Պրայմերները կապված են PCR ուժեղացման առանձնահատկությունների և արդյունավետության հետ և կարող են նախագծվել հետևյալ սկզբունքներով.

• Այբբենարանի երկարությունը՝ 18-30bp:
• GC պարունակությունը՝ 40-60%:
• Tm արժեքը. Primer նախագծման ծրագրակազմը, ինչպիսին է Primer 5-ը, կարող է տալ այբբենարանի Tm արժեքը:Վերև և ներքև գտնվող այբբենարանների Tm արժեքները պետք է հնարավորինս մոտ լինեն:Կարող է օգտագործվել նաև Tm հաշվարկման բանաձևը՝ Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T):PCR-ն իրականացնելիս որպես եռացման ջերմաստիճան սովորաբար ընտրվում է պրայմերային Tm արժեքից ցածր 5 °C ջերմաստիճան (եռացման ջերմաստիճանի համապատասխան աճը կարող է մեծացնել PCR ռեակցիայի առանձնահատկությունը):
• Պրայմերներ և PCR արտադրանք.

1. Դիզայնի այբբենարան PCR ուժեղացման արտադրանքի երկարությունը նախընտրելի է 100-150 bp:
2. Կաղապարի երկրորդական կառուցվածքային տարածքում նախագծային այբբենարանները պետք է հնարավորինս խուսափել:
3. Խուսափեք 2 կամ ավելի փոխլրացնող հիմքերի ձևավորումից վերև և ներքև գտնվող այբբենարանների 3' ծայրերի միջև:
4. Primer 3′ տերմինալային հիմքը չի կարող առկա լինել 3 լրացուցիչ հաջորդական G կամ C-ով:
5. Պրայմերներն իրենք չեն կարող ունենալ լրացուցիչ կառուցվածքներ, հակառակ դեպքում կձևավորվի մազակալի կառուցվածք, որը կազդի PCR ուժեղացման վրա:
6. ATCG-ն պետք է հնարավորինս հավասարաչափ բաշխվի այբբենարանի հաջորդականությամբ, և 3' տերմինալային հիմքը պետք է խուսափել, քանի որ T.

Հավելված1: Cell DirectRT-qPCR Հավաքածուի բաղադրիչt հավելումների փաթեթ

1.Cell Lysis Solution

Հրահանգների ձեռնարկներ.

 Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman