Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG Direct PCR Lysis Reagent (zebrafish)
Նկարագրություններ
Այս հավաքածուն օգտագործում է եզակի լիզի բուֆերային համակարգ՝ արագորեն ազատելու գենոմային ԴՆԹ-ն զեբրաձկից և այլ քաղցրահամ ձկան հյուսվածքներից, պոչերի լողակներից կամ ձկան ձվերի նմուշներից՝ PCR ռեակցիաների համար, ուստի այն հատկապես հարմար է լայնածավալ գենետիկական թեստավորման համար:Լիզի բուֆերից գենոմային ԴՆԹ-ի ազատման գործընթացը ավարտվում է 10-30 րոպեի ընթացքում 65°C-ում:Ոչ մի այլ գործընթաց, ինչպիսին է սպիտակուցի և ՌՆԹ-ի հեռացումը, չի պահանջվում, և թողարկված ԴՆԹ-ի հետքը կարող է օգտագործվել որպես PCR ռեակցիայի ձևանմուշ:
2× PCR EasyTM Mix-ը (UNG) օգտագործում է dUTP-ի փոխարեն dTTP-ը՝ 2× PCR EasyTM Mix-ի հիման վրա և ավելացնում է UNG ֆերմենտ (Uracil-N-glycosylase), որը կարող է միաժամանակ քայքայել dUTP պարունակող ձևանմուշը:Նախքան PCR ռեակցիան, UNG ֆերմենտը օգտագործվում է ուրացիլ պարունակող PCR արտադրանքը քայքայելու համար:UNG ֆերմենտը որևէ ազդեցություն չի ունենա ուրացիլ չպարունակող կաղապարի վրա՝ դրանով իսկ ապահովելով ուժեղացման առանձնահատկությունն ու ճշգրտությունը և կանխելով լայնածավալ գենետիկական թեստավորման հնարավորությունը:Տեղի է ունեցել PCR արտադրանքի աղտոտում:
D-Taq ԴՆԹ պոլիմերազը ԴՆԹ պոլիմերազ է, որը հատուկ մշակվել է Foregene-ի կողմից ուղղակի PCR ռեակցիաների համար:D-Taq ԴՆԹ պոլիմերազը ուժեղ հանդուրժողականություն ունի PCR ռեակցիայի մի շարք ինհիբիտորների նկատմամբ և կարող է արդյունավետորեն ուժեղացնել ԴՆԹ-ի հետքի քանակությունը տարբեր բարդ ռեակցիայի համակարգերում, իսկ ուժեղացման արագությունը կարող է հասնել 2 Կբ/րոպե, ինչը հատկապես հարմար է Direct PCR ռեակցիայի համար:
Տեխնիկական պայմաններ
50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns
Հավաքածուի բաղադրիչներ
Մաս I | Բուֆերային FP |
Foregene Protease | |
6× ԴՆԹ բեռնման բուֆեր | |
Մաս II | 2×PCR ՀեշտTMՄիքս (UNG) |
Հրահանգներ |
Առանձնահատկություններ և առավելություններ
■ ԴՆԹ-ի ժամանակատար և թանկարժեք մաքրում չի պահանջվում:
■ Նմուշի պահանջարկը փոքր է, կարող է փորձարկվել միայն 1 մգ ձկան պոչային լողակ կամ 10 ձկան ձու:
■ Հատուկ մշակումներ, ինչպիսիք են մանրացումը և մանրացումը, չեն պահանջվում, և գործողությունը պարզ է:
■ Anti-pollution PCR համակարգ 2× PCR EasyTM Mix (UNG), որը կարող է արդյունավետորեն վերացնել PCR արտադրանքի կողմից առաջացած աղտոտումը և ապահովել ուժեղացման առանձնահատկությունն ու ճշգրտությունը:
■ Օպտիմիզացված PCR համակարգը ստիպում է PCR-ին ունենալ ավելի բարձր սպեցիֆիկություն և ավելի ուժեղ հանդուրժողականություն PCR ռեակցիայի արգելակիչների նկատմամբ:
Կոմպլեկտի պարամետրեր
Կիրառում. Զեբրա ձուկ և այլ քաղցրահամ ջրի ձուկ:
Նմուշի լիզից ազատված ԴՆԹ. օգտագործվում է միայն որպես PCR ձևանմուշ:
Կոմպլեկտը կարող է օգտագործվել հետևյալ նպատակների համար՝ տրանսգենոզի նույնականացում, կենդանիների գենոտիպավորում և այլն։
Աշխատանքային ընթացք
Պահպանում և պահպանման ժամկետ
Այս փաթեթի I մասը պետք է պահվի 2-8℃ ջերմաստիճանում:
Reagent Buffer FP-ը կարող է պահվել 12 ամիս չոր պայմաններում;այն կարելի է պահել 2-8℃ ջերմաստիճանում՝ ավելի երկար պահելու համար:
v Reagent Foregene Protease-ն ունի յուրահատուկ բանաձեւ.Իր ակտիվությունն ու կայունությունն ապահովելու համար խնդրում ենք պահել այն 4℃ ջերմաստիճանում 12 ամիս:
vReagent 6×DNA Loading Buffer-ը կարելի է երկար ժամանակ պահել 4℃ կամ -20℃ ջերմաստիճանում:
Այս փաթեթի II մասը պետք է պահվի -20℃ ջերմաստիճանում:
vReagent 2×PCR EasyTM Mix(UNG), հաճախակի օգտագործման դեպքում այն կարող է պահվել նաև 4℃ ջերմաստիճանում՝ կարճաժամկետ պահպանման համար (օգտագործել 10 օրվա ընթացքում):