Lnc-RT Heroᵀᴹ I (gDNase) (սուպեր պրեմիքս առաջին շղթայի cDNA սինթեզի համար lncRNA-ից)
Տեխնիկական պայմաններ
25×20μլ Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I-ը (gDNase-ով) հակադարձ տառադարձման համակարգ է, որը հատուկ մշակվել է lncRNA-ի համար՝ գենոմային ԴՆԹ-ի աղտոտվածությունը արագ հեռացնելու համար:5×gDNase Mix-ը կարող է արագ հեռացնել ՌՆԹ-ում մնացած գենոմը 42°C ջերմաստիճանում 2 րոպեի ընթացքում՝ արդյունավետորեն խուսափելով qPCR արդյունքների վրա գենոմի միջամտությունից:
5×L-RT HeroTM Mix-ը պարունակում է Foregene LncRNA հակադարձ տրանսկրիպտազա, որը հատուկ մշակվել է Foregene-ի կողմից, որը հակադարձ տրանսկրիպտազի նոր տեսակ է հատուկ lncRNA-ի և երկար ՌՆԹ-ի այլ բարդ ձևանմուշների համար՝ ՌՆԹ-ի ավելի ուժեղ կապակցությամբ և հետադարձ գրանցման ավելի բարձր արդյունավետությամբ:Օպտիմիզացված համակարգը դարձնում է հակադարձ տառադարձման արագությունը և կարող է հեշտությամբ տառադարձել ՌՆԹ կաղապարներ բարձր GC պարունակությամբ և բարդ երկրորդական կառուցվածքով:Առաջին շղթայի cDNA-ի սինթեզը կարող է ավարտվել 42°C ջերմաստիճանում 15 րոպեում:
Հավաքածուի բաղադրիչներ
| 5× gDNase Mix |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| ՌՆազազերծ ddH2O |
| Հրահանգներ |
Առանձնահատկություններ և առավելություններ
■gDNA-ն հեռացնելու արդյունավետ ունակություն, որը կարող է հեռացնել gDNA-ն կաղապարում 2 րոպեի ընթացքում:
■ Այն կարող է արդյունավետ կերպով հակադարձել lncRNA-ի տառադարձումը:Երբ հակադարձ արտագրման արտադրանքը ենթարկվում է qPCR, Ct-ի արժեքն ավելի ցածր է, քան սովորական հակադարձ տառադարձման համակարգի արժեքը:
■ Արդյունավետ հակադարձ արտագրման համակարգ, առաջին շղթայի cDNA-ի սինթեզն ավարտելու համար պահանջվում է ընդամենը 15 րոպե:
■ Բարդ ձևանմուշներ. GC-ի բարձր պարունակությամբ և բարդ երկրորդական կառուցվածքով ձևանմուշները նույնպես կարող են շրջվել բարձր արդյունավետությամբ:
■ Բարձր զգայուն հակադարձ արտագրման համակարգ, pg մակարդակի ձևանմուշները կարող են նաև ստանալ բարձրորակ cDNA:
■ Հակադարձ արտագրման համակարգն ունի բարձր ջերմային կայունություն, ռեակցիայի օպտիմալ ջերմաստիճանը 42 է℃, և այն դեռևս ունի լավ հակադարձ տառադարձման կատարում 50-ում℃.
Կոմպլեկտի հավելված
lncRNA հարաբերական քանակական վերլուծություն.
lncRNA բացարձակ քանակական վերլուծություն.
Այն կարող է արագ և ճշգրիտ վերլուծել հետք ՌՆԹ, ինչպիսին ՌՆԹ վիրուսն է:
Բարձր GC պարունակությամբ կամ բարդ երկրորդական կառուցվածքով ՌՆԹ կաղապարների հակադարձ տառադարձում:
Աշխատանքային հոսք
Պահպանում և պահպանման ժամկետ
Կոմպլեկտը պետք է պահվի -20-ում°Գ. Ապրանքը պահեք մշտական ջերմաստիճանի սառնարանում -20 ջերմաստիճանում°C անմիջապես ստանալուց հետո:Եթե պահպանման պայմանները համապատասխան են, արտադրանքը չի վատթարացնի որևէ կատարողականություն 1 տարվա գործողության ընթացքում:
Խնդրի վերլուծության ուղեցույց
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-հատուկ ուժեղացում
1. Անհիմն այբբենարանի ձևավորում
Առաջարկություն. Նախագծեք այբբենարանները ըստ այբբենարանի նախագծման սկզբունքների:
2. Գենոմի մնացորդներ.
Առաջարկ. Համոզվեք, որ gDNA-ի հեռացման ռեակցիայի ջերմաստիճանի առաջին քայլը 42°C է, և ռեակցիայի ժամանակը կարող է նաև երկարացվել մինչև 5 րոպե:
RT-qPCR-ով ուժեղացման ազդանշան չկա
1. ՌՆԹ-ն քայքայված է:
Առաջարկություն. ՌՆԹ արդյունահանման նյութը պետք է լինի հնարավորինս թարմ, և օգտագործվի բարձրորակ և բարձր մաքրության ՌՆԹ:
2. ՌՆԹ-ն պարունակում է ինհիբիտորներ:
Առաջարկություն. Հակադարձ արտագրման արգելակիչները սովորաբար ներառում են SDS, գուանիդինի աղեր, EDTA և այլն: Խորհուրդ է տրվում ՌՆԹ նստվածքը լվանալ 70% էթանոլով` արգելակիչները հեռացնելու համար:
3. Այբբենարանի նախագծման խնդիրներ.
Առաջարկություն. Համաձայն այբբենարանի նախագծման սկզբունքի, վերանախագծեք այբբենարանները ստուգման համար:
Թիրախային գոտին հայտնվում է դատարկ հսկողության մեջ
1. Գործող գործիքների կամ ռեակտիվների աղտոտում:
Առաջարկություն. Փորձի համար նախատեսված բոլոր ռեակտիվները կամ սարքավորումները պետք է ավտոկլավացված լինեն:Եղեք զգույշ և նրբանկատորեն աշխատելիս, որպեսզի կանխեք ԴՆԹ-ի նմուշները խողովակի մեջ ներծծվելը կամ ցենտրիֆուգի խողովակից դուրս թափվելը:
2. ՊՇՌ ռեակցիայի համակարգի պատրաստման ժամանակ առաջացել է աղտոտում:
Առաջարկություն. Ձեռք բերեք անհրաժեշտ նախազգուշական միջոցներ, ինչպես օրինակ՝ կրել լատեքսային ձեռնոցներ, օգտագործել ֆիլտրի ծայրերը:Օգտագործեք իրական ժամանակի PCR Mix-ը աղտոտվածությունից պաշտպանված համակարգում:
3. Պրայմերները քայքայված են:
Առաջարկ. Օգտագործեք SDS-PAGE էլեկտրոֆորեզ՝ պարզելու համար, թե արդյոք այբբենարանները քայքայված են, և փոխարինեք նոր պրայմերներով՝ ֆլուորեսցենտային հայտնաբերման փորձերի համար:
Հրահանգների ձեռնարկ.
