ForeDirect RT-qPCR հավաքածու
Հավաքածուի նկարագրություն.
◮ՌՆԹ-ի ուղղակի իրական ժամանակում ուժեղացման համար շվաբրերի հավաքածուներից առանց ՌՆԹ-ի մաքրման գործընթացների:Այս հավաքածուն ավարտում է qRT-PCR ցիկլերը մեկ ժամվա ընթացքում:Ֆերմենտային խառնուրդը հակադարձ տրանսկրիպտազի, Hot-Start Taq ԴՆԹ պոլիմերազի, RNase ինհիբիտորի օպտիմիզացված խառնուրդ է:Ռեակցիայի բուֆերը պարունակում է բոլոր անհրաժեշտ բաղադրիչները, ներառյալ օպտիմիզացված բուֆերային բաղադրիչները, Mg2+, dUTP և dNTP:
Նկարագրություն
ForeDirect RT-qPCR Kit-ը նախատեսված է ՌՆԹ-ի ուղիղ իրական ժամանակում ուժեղացման համար շվաբրերի հավաքածուներից՝ առանց ՌՆԹ-ի մաքրման գործընթացների:Այս հավաքածուն ավարտում է qRT-PCR ցիկլերը մեկ ժամվա ընթացքում:Ֆերմենտային խառնուրդը հակադարձ տրանսկրիպտազի, Hot-Start Taq ԴՆԹ պոլիմերազի, RNase ինհիբիտորի օպտիմիզացված խառնուրդ է:Ռեակցիայի բուֆերը պարունակում է բոլոր անհրաժեշտ բաղադրիչները, ներառյալ օպտիմիզացված բուֆերային բաղադրիչները, Mg2+, dUTP և dNTP:
Տեխնիկական պայմաններ
100 Տ
Հավաքածուի բաղադրիչներ
| Նուկլեինաթթվի ազատման միջոց |
| ՌՆԹ պաշտպանիչ |
| 2× RT-qPCR բուֆեր |
| Ֆերմենտային խառնուրդ (Taq&M-MLV) |
| Հրահանգներ |
PCR հավելված
1. Երբ PCR ռեակցիայի խողովակները կարճ ժամանակով ցենտրիֆուգվեն, դրանք տեղադրեք ուժեղացման գործիքի նմուշառման բաքում:
2. Ջերմային արձանագրություն
| Քայլ | Ջերմաստիճանը | Ժամանակը | Ցիկլեր | |
| 1 | Հակադարձ արտագրում | 50℃ | 15 րոպե | 1 |
| 2 | Նախադենատուրացիա | 95℃ | 1 րոպե | 1 |
| 3 | Դենատուրացիա | 95℃ | 10 վայրկյան | 42 |
| 4 | Anneal/Extension | 60℃ | 30 վայրկյան | |
Նշում:Լյումինեսցենտային ազդանշանը հայտնաբերվել է յուրաքանչյուր ցիկլի երկարացման քայլից անմիջապես հետո:
3. Կարգավորումից հետո պահեք ֆայլը և գործարկեք արձագանքման ծրագիրը։
Գործառնական քայլեր
Նախքան ռեագենտի պատրաստումը, փաթեթի բոլոր ռեակտիվները պետք է հալվեն սենյակային ջերմաստիճանում և նրբորեն խառնվեն:
Ռեագենտի պատրաստում
1. Պատրաստեք նուկլեինաթթվի ազատման խառնուրդը
| Բաղադրիչ | Ծավալը մեկ նմուշի կամ վերահսկման համար |
| Նուկլեինաթթվի ազատման միջոց | 5 մլ |
| ՌՆԹ պաշտպանիչ | 0,5 մլ |
2. Պատրաստեք ռեակցիայի խառնուրդը
| Բաղադրիչ | Ծավալը մեկ նմուշի կամ վերահսկման համար |
| 2× RT-qPCR բուֆեր | 15 մլ |
| Ֆերմենտային խառնուրդ (Taq&M-MLV) | 1,5 մլ |
| Այբբենարաններ և զոնդեր | 1 մլ |
Պահպանում և պահպանման ժամկետ
-Հավաքածուն պետք է պահվի -20-ում± 5℃.Գործողության ժամկետը 12 ամիս է։
- Խուսափեք սառեցման-հալման կրկնվող ցիկլերից (<5 ցիկլեր):
